[发明专利]一种血液和尿液中亚硝酸盐的快速检测方法

摘要

本发明公开了一种血液、尿液中亚硝酸盐的快速检测方法。利用亚硝酸盐与Griess试剂发生重氮化偶合反应，形成偶氮化合物，进行浊点萃取，将有色偶氮化合物沉于在离心管底，将管底红色与标准色阶比较，根据颜色深浅判断其含量。由于浊点萃取的富集倍数大，且血液、尿液经脱色及脱蛋白处理，大大消除干扰，体系中亚硝酸盐检测限可达0.01µg/mL。该发明具有简单、快速、灵敏度高、可现场检测等特点。

主权项

一种血液和尿液中亚硝酸盐快速检测方法，包括以下步骤：(1)制备亚硝酸盐标准色阶溶液：取浓度为10.0μg/mL的NO₂^‑标准溶液0.01、0.05、0.10、0.30、0.70、1.0mL于刻度离心管中，用蒸馏水稀释至5mL，加入GriessA试剂250μL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250μL，混合均匀，加入非离子表面活性剂0.5mL，盐0.1～0.5g，涡旋混合1min，离心分相，在离心管底出现红色由浅至深的微滴色阶溶液。(2)检测尿液中的亚硝酸盐：取10mL尿液，硫酸锌0.4～1.0g，加入脱色剂0.5～1.0g，混合均匀，离心脱色，滤纸过滤除去脱色剂；取5mL脱色后的尿液，加入GriessA试剂250μL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250μL，混合均匀，放置5min后，加入非离子表面活性剂0.5mL，盐0.1～0.5g，涡旋混合1min，离心分相，将管底形成的微滴的颜色与步骤(1)标准色阶比较，判断其含量。(3)检测血液中的亚硝酸盐：取5mL新鲜血液，放入离心机中离心，取上清液，加入0.1mol/L氢氧化钠溶液0.2mL和硫酸锌0.2g，混合均匀，加入乙腈1mL，离心分离，取上清液2mL于10mL离心管中用蒸馏水定容至5mL，加入GriessA试剂250μL，混合均匀；1min后加入GriessB试剂250μL，混合均匀，放置5min，加入非离子表面活性剂0.5mL，盐0.1～0.5g，涡旋混合1min，离心分相，将管底形成的微滴的颜色与步骤(1)标准色阶比较，判断其含量。