[发明专利]百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法

摘要

本发明提供一种百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法，通过预处理、内生菌浸出、表面消毒、接种培养、连续消毒，采用无菌去离子水浸泡百合外植体，可以使外植体表层细胞破裂，内生菌溢出，易于清除。并采用连续表面消毒，消毒三次后百合外植体的内生菌污染率可以控制在5%左右，为百合组织培养产业解决了内生菌污染严重的问题。该种百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法，能够有效的杀灭百合鳞片中的内生菌，为百合的组织培养提供了一种易操作、效果好的外植体制备方法，且在整个过程中较大程度地节约材料、降低成本，并能够最大限度的脱除百合外植体中的内生菌，与常规的方法相比大大的节省了百合外植体，减少了人力物力的投入。

主权项

一种百合组织培养中脱除外植体内生菌的方法，其特征在于,包括以下步骤：a、预处理：将百合鳞茎用清水清洗去除表面泥沙，剥下鳞片再次清洗，在超净台中将百合鳞片切成小块；b、内生菌浸出：将步骤a中所得百合鳞片小块放入装有无菌去离子水的容器中，容器密封后放置将内生菌浸出；c、表面消毒：在超净台中将步骤b中无菌去离子水浸泡过的百合鳞片小块进行表面消毒；d、接种培养：将步骤c中表面消毒后的百合鳞片小块接种到固体培养基中，培养观察有无内生菌； e、连续消毒：在步骤d的接种后培养观察，如果培养基中长出百合内生菌，取出百合鳞片进行连续消毒后继续接种观察，重复对长出百合内生菌的百合鳞片进行连续消毒与接种观察，直到培养基中无百合内生菌长出。