[发明专利]淡水四大家鱼分子鉴定的方法无效
| 申请号： | 201310224987.0 | 申请日： | 2013-06-07 |
| 公开（公告）号： | CN103276092A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 汪登强;程晓凤;陈大庆;刘绍平;段辛斌;王珂;刘明典 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院长江水产研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 荆州市技经专利事务所 42219 | 代理人： | 韩志刚 |
| 地址： | 434000 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 淡水四大家鱼分子鉴定的方法，该方法包括以下步骤：（1）基因组DNA提取；（2）PCR扩增；（3）PCR反应：反应程序94℃预变性5min,然后94℃变性30s、62℃退火30s、72℃延伸1min，共进行30个循环，循环结束后72℃再延伸8min；（4）电泳检测：PCR结束后，取2~5μL溶液在1%琼脂糖凝胶上电泳，观察照相；（5）结果判断。本发明操作简单、判断准确、费用低。 | ||
| 搜索关键词： | 淡水 大家 分子 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
淡水四大家鱼分子鉴定的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：（1）基因组DNA提取：提取DNA备用；（2）PCR扩增：利用引物对DNA溶液扩增，扩增体系为：10×PCR buffer（含Mg2+）2.5μL、dNTPs 0.25 mmol/L、引物各20 pmol/L、Taq DNA聚合酶1 U、DNA模板10~200 ng，补充灭菌双蒸水至20μL；（3）PCR反应：反应程序94℃预变性5 min, 然后94℃变性30 s、62℃退火30 s、72℃延伸1 min，共进行30个循环，循环结束后72℃再延伸8 min；（4）电泳检测：PCR结束后，取2~5μL溶液在1%琼脂糖凝胶上电泳，观察照相；（5）结果判断：结合四大家鱼的引物，出现一条大小约900 bp DNA带的且与引物相对应的即为草鱼；出现一条大小约750 bp DNA带的且与引物相对应的即为青鱼；出现一条大小约1000 bp DNA带的且与引物相对应的即为鲢；出现一条大小约700 bp DNA带的且与引物相对应的即为鳙，其他种类无扩增产物或无明显目的 DNA带。
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