[发明专利]一种酸奶中乳酸含量的快速测定方法

摘要

本发明公开了一种酸奶中乳酸含量的快速测定方法，该方法将微透析采样技术与在线电化学方法相结合，实现酸奶中乳酸含量快速测定和跟踪分析。其技术特点是借用微透析取样技术，利用乳酸脱氢酶-亚甲基绿-单壁碳纳米管（LDH-MG-SWNT）修饰的玻碳电极，应用电化学方法在线对酸奶中乳酸含量进行定量测定，具有良好的选择性、稳定性和重现性，具有操作简便快速、测定结果准确灵敏的特点。本发明实际样品无需前处理，避免了样品损失和误差，实现了实时、在线取样，连续快速检测。在食品科学及其相关方面具有广泛的应用前景。

主权项

一种酸奶中乳酸含量的快速测定方法，其特征在于：包括微透析取样方式、LDH‑MG‑SWNT修饰的玻碳电极的制备和电化学测定条件；所述的微透析取样方式如下：称取酸奶后加入人工脑脊液稀释，酸奶和人工脑脊液的比为1:4~6（mg/ mL）,将微透析探针插入稀释后的酸奶中，灌流平衡10 min ‑15 min后，将酸奶透析液接入薄层电化学流动池中，测定该酸奶透析液中乳酸的含量，人工脑脊液由微量注射器经微透析泵泵进微透析探针，流速为1μL /min ‑2 μL /min；所述的LDH‑MG‑SWNT修饰的玻碳电极的制备如下：将2 mg ‑4 mg SWNT和3 mg ‑7 mg MG 同时加入3 mL ‑8 mL蒸馏水中，超声2 h，得到分散均匀的MG‑SWNT悬浊液，取5μL ‑10 μL悬浊液滴涂到玻碳电极的表面，在室温下干燥，然后将20 mg /mL LDH溶液4μL ‑8 μL、1％BSA溶液2μL ‑5 μL和1％戊二醛溶液3μL ‑7μL混合滴涂在MG‑SWNT玻碳电极上，干燥5min‑10min后即得到乳酸脱氢酶修饰的碳纳米管玻碳工作电极，将电极固定在薄层电化学流动池中，用于检测乳酸； 所述的电化学测定条件是：电化学实验在多通道电化学工作站（CHI1030）上进行，电化学测定使用三电极体系，薄层电化学流动池是由乳酸脱氢酶修饰的碳纳米管玻碳电极作为工作电极，Ag/AgCl(KCl‑sat)作为参比电极，铂丝作为对电极，组成薄层的膜（Gasket）厚为40μm ‑50 μm，工作电极电压为0V，辅酶NAD+流速为3μL /min ‑5 μL /min。