[发明专利]一种多负电荷血红蛋白α亚基

摘要

一种多负电荷血红蛋白α亚基，涉及一种构成血红蛋白类红细胞代用品人造血的组成成分，属于生物医药技术领域，是由人血清白蛋白和人血红蛋白α亚基组成的融合蛋白，人血清白蛋白和人血红蛋白之间由连接肽连接而成；其制备方法：通过PCR扩增的方法或用化学方法全合成方法合成所述的融合蛋白多肽链氨基酸序列；将融合蛋白多肽链氨基酸序列克隆至原核表达载体中；将表达载体转化至表达体系的细胞中；通过诱导的方法鉴定含有有效的细胞；对细胞进行分离和纯化；所述的融合蛋白的分子量大和携带很多负电荷这两个因素导致即便是单体的形式也不能够通过肾过滤，降低对人体的副作用；人血清白蛋白也可以结合血红素；因此用该融合蛋白制备人造血有更强的结合和运输氧气的能力。

主权项

一种多负电荷血红蛋白α亚基，其特征在于：所述的多负电荷血红蛋白α亚基是由人血清白蛋白和人血红蛋白α亚基组成的融合蛋白；所述的融合蛋白是由人血清白蛋白和人血红蛋白之间由连接肽连接而成；所述的融合蛋白的N‑末端由带负电荷的人血清白蛋白结构域和C‑末端的人血红蛋白α结构域组成；所述的融合蛋白多肽链氨基酸序列：MDAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGL‑连接肽‑‑VLSPADKTNVKAAWGKVGAHAGEYGAEALERMFLSFPTTKTYFPHFDLSHGSAQVKGHGKKVADALTNAVAHVDDMPNALSALSDLHAHKLRVDPVNFKLLSHCLLVTLAAHLPAEFTPAVHASLDKFLASVSTVLTSKYR。