[发明专利]多种抗原免疫高通量制备单克隆抗体及其杂交瘤细胞株的方法无效
| 申请号： | 201310152897.5 | 申请日： | 2013-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN103255128A | 公开（公告）日： | 2013-08-21 |
| 发明（设计）人： | 刘莹;刘静;左威;郝露;张莉莉;甄蓓 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/06 | 分类号： | C12N15/06;C12N5/20;C07K16/18;C07K16/32 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种多种抗原免疫高通量制备单克隆抗体及其杂交瘤细胞株的方法。本发明提供利用多种抗原免疫高通量制备分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株的方法，包括如下步骤：1）用n种抗原蛋白混合作为免疫抗原免疫小鼠，得到免疫后小鼠；2）所述免疫后小鼠的离体脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，得到融合细胞；3）将融合细胞进行第一轮ELISA筛选，选取发生免疫阳性的杂交瘤细胞；4）将所述发生免疫阳性反应的杂交瘤细胞进行第二轮ELISA筛选，选取针对单一抗原免疫阳性反应的杂交瘤细胞；本发明建立了一种通过一次细胞融合获得多种蛋白单克隆抗体的高通量技术方法，为单抗制备节省了时间和人力成本，并为提高单克隆抗体的生产效率做出了贡献。 | ||
| 搜索关键词： | 多种 抗原 免疫 通量 制备 单克隆抗体 及其 杂交瘤 细胞株 方法 | ||
【主权项】：
一种利用多种抗原高通量制备分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株的方法，包括如下步骤：1）用n种目标蛋白的混合物作为免疫抗原免疫小鼠，得到免疫后小鼠；n大于4且小于15；所述n种目标蛋白的混合物为将n种目标蛋白混合，得到的混合物；2）收集处死后的步骤1）所得免疫小鼠的脾细胞；将所述脾细胞与骨髓瘤细胞融合，得到融合细胞；3）对所述融合细胞进行第一轮ELISA检测，选取发生免疫阳性反应的杂交瘤细胞；所述第一轮ELISA检测中，将所述n种目标蛋白混合物包被作为抗原、一抗为所述融合细胞的细胞培养上清液、二抗为抗小鼠IgG的抗体；4）将所述发生免疫阳性反应的杂交瘤细胞进行第二轮ELISA检测，选取针对单一抗原发生免疫阳性的杂交瘤细胞株，即为分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞；所述第二轮ELISA检测中，将n种目标蛋白单独包被作为抗原、一抗为所述发生免疫阳性反应的杂交瘤细胞的细胞培养上清液、二抗为抗小鼠IgG的抗体；所述单一抗原为n种目标蛋白中任一种。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所，未经中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201310152897.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
