[发明专利]一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞有效
| 申请号： | 201310126017.7 | 申请日： | 2013-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN103215295A | 公开（公告）日： | 2013-07-24 |
| 发明（设计）人： | 刘旭;张涌;王勇胜;郭文江;权富生 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学;杨凌科元克隆股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N5/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人： | 汪人和 |
| 地址： | 712100 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明使用电穿孔的方法将打靶载体pCSN2-Lys-Neo-EGFP和锌指核酸酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，经过G418药物筛选和PCR分析后获得了打靶的阳性克隆细胞，以打靶的阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎，为研制抗乳房炎的转基因奶牛提供坚实的基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 蛋白 定点 整合 lys 基因 打靶 载体 及其 构建 细胞 | ||
【主权项】：
一种Lys乳腺特异性打靶载体，其特征在于，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β‑酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。
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