[发明专利]实时荧光PCR中目的基因的表达量的校正方法有效

专利信息
申请号: 201310121958.1 申请日: 2013-03-26
公开(公告)号: CN103173559A 公开(公告)日: 2013-06-26
发明(设计)人: 朱砺;张顺华;朱康平;李雪梅;李学杰;陈晨;洪蜜;袁红敏;张宇;熊勇 申请(专利权)人: 四川农业大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;G01N21/64
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 625000 四川省雅安市雨*** 国省代码: 四川;51
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摘要: 发明公开了实时荧光PCR中目的基因的表达量的校正方法,本方法主要是通过看家基因模板和已有cDNA按照一定比例的混合以后作为模板进行荧光定量,根据混合的比例所导致的Ct值的差异来计算得到看家基因在各个样本中的表达量,通过这个定量结果来对目的基因的表达量进行校正。
搜索关键词: 实时 荧光 pcr 目的 基因 表达 校正 方法
【主权项】:
实时荧光PCR中目的基因的表达量的校正方法,其特征在于包括如下步骤:1)按照设定的体积比a:b将反转录产物的试验样品和参照模板混合作为模板cDNA进行荧光定量PCR反应,并针对每一个不同的样本分别重复以上步骤得到Ct(1。。。。n);2)在进行实时荧光定量PCR反应时增加以参照模板为样本的反应孔,体积总量与步骤(1)相同,得到Ct0;3)按照2‑ΔCT法、2‑ΔΔCT法或者Pfaffl法得到基因的相对表达量;4)根据步骤1)的混合比例得到方程一:ax+by=2^(‑Ctn),根据步骤2)得到方程二:(a+b)y=2^(‑Ct0),联解方程组可以得到各个样本看家基因的相对表达量x;5)以根据方程组联解得到的看家基因相对表达量来对目的基因表达量进行校正。
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