[发明专利]反硝化细菌筛选鉴定试剂盒及筛选鉴定方法

摘要

一种反硝化细菌筛选鉴定试剂盒及反销化细菌筛选鉴定方法，试剂盒包括反硝化鉴定预制管；菌株富集管；菌种保藏液；筛选鉴定方法是将待检测菌株经菌株富集管富集后接种到反硝化鉴定预制管培养，同时用菌株保藏液将富集菌液保存；反硝化鉴定管经静止培养后，根据培养基颜色变化和产气情况判断菌种反硝化能力。本发明的优点是实现反硝化细菌便捷、定量的鉴定效果，实现菌株培养、鉴定、保藏一站式操作。

主权项

一种反硝化细菌筛选鉴定试剂盒，其特征在于：它是由菌株富集管、反硝化鉴定预制管、菌株保藏液组成；其中:菌株富集管：菌株富集管为装有富集培养基的螺口冻存管，其中每升富集培养基所含成分如下：牛肉膏1‑3g，蛋白胨1‑3g，葡萄糖0.8‑2.1g，磷酸二氢钾480‑890mg，磷酸氢二钠0.7‑1.5g，硫酸镁100‑200mg，氯化钙20‑50mg，碳酸氢钠20‑120mg，微量元素母液A 1ml，微量元素母液B 1ml，以上培养基用浓度5%的碳酸钠和HCl调pH至7.00‑7.50；富集培养基配制完成并调完pH后，将富集培养基分装到1.8ml螺口冻存管中，每支冻存管加入富集培养基1ml，分装完毕后，115℃灭菌25‑30min；反硝化鉴定预制管：反硝化鉴定预制管中装有反硝化鉴定培养基，每升反硝化鉴定培养基所含成分如下：牛肉膏0.1‑0.5g，蛋白胨0.1‑0.5g，琥珀酸钠1‑3g，醋酸钠0.1‑0.8g，磷酸二氢钾480‑890mg，磷酸氢二钠0.5‑1.5g，硫酸镁100‑200mg，氯化钙5‑50mg，EDTA二钠10‑100mg，硝酸钾1‑2g，亚硝酸钠0.1‑1g，1%溴百里酚蓝乙醇溶液1ml，微量元素母液A 1ml，微量元素母液B 1ml，以上培养基用浓度10%的氢氧化钠和HCl调pH至7.00‑7.50；反硝化鉴定培养基配制完成并调完pH后，将反硝化鉴定培养基分装到反硝化鉴定预制管中，115℃灭菌25‑30min；菌株保藏液：菌株保藏液成分如下：甘油40‑60ml，去离子水40‑60ml；，115℃灭菌25‑30min；其中：每升微量元素母液A所含成分如下：硫酸亚铁5g，EDTA二钠5g；其中：每升微量元素母液B所含成分如下： EDTA二钠1.5g，ZnSO4.7H2O 430mg，CoCl2.6H2O 240mg，MnCl2 629mg，CuSO4.5H2O 250mg，Na2MoO4.2H2O 220mg，NiCl2.6H2O 190 mg，H3BO3 14mg。