[发明专利]一种Micro RNA表达检测方法及其定量检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种MicroRNA表达检测方法及其定量检测试剂盒。该方法包括：（1）提取样品的MicroRNA，将该MicroRNA连接PolyA尾巴；（2）将三条具有茎环结构的引物混合后退火处理，（3）将连有PolyA尾巴的MicroRNA与具有茎环结构的引物退火连接，（4）以该MicroRNA为模板反转录得到cDNA，（5）以该cDNA为模板，加入扩增目标MicroRNA的引物，通过荧光定量PCR方法检测目标MicroRNA表达。所述方法通过一次反转录可得到待测对象所有的MicroRNA及内参基因，大大降低了引物二聚体以及复杂发卡结构的生成，大幅度提高了对MicroRNA的检测效率。

主权项

一种Micro RNA表达检测方法，其特征在于，所述Micro RNA表达检测方法包括以下步骤：（1）提取样品的Micro RNA，将所得Micro RNA连接PolyA尾巴；（2）将三条具有茎环结构的引物混合后进行退火处理，所述具有茎环结构的引物的序列分别如序列表中SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ IDNO:3所示；（3）将步骤（1）所得连有Poly A尾巴的Micro RNA与步骤（2）所得具有茎环结构的引物退火连接；（4）以步骤（3）所得Micro RNA为模板反转录得到cDNA；（5）以步骤（4）所得cDNA为模板，加入扩增目标Micro RNA的引物，通过荧光定量PCR方法检测目标Micro RNA的表达。