[发明专利]一种筛选产生淀粉糖化酶菌株的方法无效
申请号: | 201310025321.2 | 申请日: | 2013-01-23 |
公开(公告)号: | CN103060246A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 张家明;钟坤;谭德冠;孙雪飘;韩冰莹 | 申请(专利权)人: | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/14;C12N1/02 |
代理公司: | 海口翔翔专利事务有限公司 46001 | 代理人: | 莫臻 |
地址: | 570000 海*** | 国省代码: | 海南;66 |
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摘要: | 本发明涉及一种筛选产生淀粉糖化酶菌种的方法,是将不溶性生淀粉用化学方法消毒灭菌;配制平皿筛选培养基;取腐烂木薯、其他植物组织或土样浸提,将浸提液稀释后加入平皿筛选培养基中培养,挑取生长旺盛、水解透明圈明显的菌落分离纯化,将分离纯化的菌株进一步培养,优化产酶条件,测定酶学特性。本发明利用糖化酶产生菌可以在筛选培养基上形成透明水解圈的特性,不需要滴加碘液染色,不需要先保存大量菌株再进行筛选,可以直接从平皿上挑出菌落进行纯化进入后续研究过程,操作简单,安全。 | ||
搜索关键词: | 一种 筛选 产生 淀粉 糖化酶 菌株 方法 | ||
【主权项】:
一种筛选产生淀粉糖化酶菌种的方法,其特征在于,其步骤如下:1)、取不溶性生淀粉进行消毒灭菌;2)、配制筛选培养基平皿筛选培养基的配方为:NaNO3 0.1~0.5%、K2HPO4 0.1~0.3%、MgSO4·7H2O 0.03~0.1%、KCl0.03~0.1%、FeSO4·7H2O0.001~0.003%、琼脂粉1~3%,pH=5.5~7.5,高温灭菌;待培养基冷却到60~85℃时,加入经过灭菌的不溶性生淀粉,使不溶性生淀粉的浓度达到1~3%,迅速倒平皿;3)、从田间收集腐烂木薯、其他植物组织或土样,用无菌水浸提,稀释后涂布在平皿筛选培养基上,25~40℃下培养2~3天,挑取生长旺盛、水解透明圈明显的菌落分离纯化,再接种平板分离培养基中25~40℃培养2~3天,验证透明圈;4)、将分离纯化的菌株进一步培养,优化产酶条件,测定酶学特性。
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