[发明专利]一种布拉氏酵母菌表面展示系统及其构建方法

摘要

本发明涉及一种蛋白表面展示系统，具体提供了一种以布拉氏酵母菌为表面展示平台表达外源蛋白质的表面展示系统，本系统从布拉氏酵母菌，购自法国百科达制药厂，进口药品注册证号为s20040038，的DNA组中扩增得到AGA1基因以及AGA2基因，并以pPIC9AGA2质粒为模板扩增AGA2基因表达核,用布拉氏酵母菌的AGA2基因替换上述AGA2基因表达核中的AGA2基因。将获得的AGA1基因和替换后的AGA2基因表达核连接到基础质粒pSP上，分别在超表达启动子TEF1和PGK1控制之下，由此得到能够在布拉氏酵母菌表面表达的通用表面展示表达质粒pSDSb。本发明能够持续表达和Aga2p融合的异源蛋白质并展示在布拉氏酵母菌地表面，从而超表达某些异源蛋白，将其作为病原活疫苗载体和研究蛋白与蛋白之间的相互作用具有其它微生物载体不可取代的作用。

主权项

一种布拉氏酵母菌表面展示系统，其特征在于：该系统以pSP为基础质粒,将AGA1基因，其基因序列如Seq ID No:8所示，AGA2基因表达核，其基因序列如Seq ID No:10所示，克隆到基础质粒pSP上构建布拉氏酵母菌表面展示通用表达质粒pSDSb，该通用表达质粒含有在布拉氏酵母菌表面表达和表面展示的所有元件，异源蛋白与该通用质粒的Aga2p的C端融合从而表面展示在布拉氏酵母菌细胞壁上。