[发明专利]龙胆泻肝颗粒的新检测方法

摘要

本发明涉及一种龙胆泻肝颗粒的新检测方法，属于中药现代化领域。本发明通过建立对君药龙胆及臣药黄芩的鉴别和含量测定及栀子的含量测定，并配合原有的栀子的鉴别，能更全面的检测该药物的成分和其配伍，规范了龙胆泻肝颗粒的检测方法，有助于了解其含量和稳定性，也有助于说明药物的药用物质基础。

主权项

一种龙胆泻肝颗粒的检测方法，包括如下鉴别方法：（1）取本品龙胆泻肝颗粒12g，加水30ml，加热使溶解，放冷，用乙醚提取3次，每次15ml，弃去乙醚液，再用水饱合的正丁醇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，加等体积氨试液，摇匀，放置分层，分取上清液，减压回收正丁醇至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；参照中国药典2005年版一部附录VI B的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯：丙酮：甲酸：水=5：5：1：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在110℃烘约10分钟，至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；其特征在于还包括如下鉴别方法和含量测定方法：（一）鉴别方法（2）取本品龙胆泻肝颗粒12g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml，加热使溶解，放冷，用水饱合正丁醇提取2次，每次15ml，合并正丁醇提取液，减压回收正丁醇至干，残渣加甲醇2ml使溶解，加于已处理好的中性氧化铝柱上，所装中性氧化铝120目，2g，柱内径15mm，用甲醇20ml洗脱，洗脱液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取龙胆苦苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各3μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿：甲醇：水=13：6：2，10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检识，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（3）取本品龙胆泻肝颗粒12g，研细，加甲醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml，加热使溶解，放冷，用水饱合正丁醇提取2次，每次15ml，合并正丁醇提取液，减压回收正丁醇至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯：丁酮：甲酸：水=5：3：1.1：1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；（二）含量测定方法（1）照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇：水=20:80为流动相；检测波长为270nm；理论板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000；对照品溶液的制备：取龙胆苦苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含25μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品龙胆泻肝颗粒，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，功率为250W，频率为50kHz，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，混匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；（2）对照品溶液的制备：精密称取在60℃减压干燥4小时的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μl的溶液，即得；供试品溶液制备：取装量差异项下的本品龙胆泻肝颗粒，充分研细，取1.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加60%甲醇45ml，超声处理， 30分钟，功率150W，频率25KHz，放冷至室温，加60%甲醇至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得；照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇：水：磷酸=47：53：0.2为流动相；检测波长为280nm；理论板数按黄芩苷峰计算，应不低于2500；测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱液，测定，即得；（3）对照品溶液的制备：取栀子苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含30μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品龙胆泻肝颗粒，充分研细，取1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，称定重量，超声处理20分钟，功率为300W，频率为50kHz，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液10ml，置25ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验 ：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：水=11:89为流动相；检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于2000；测定法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。