[发明专利]一种快速测定食品中生物胺的方法

摘要

一种快速测定食品中生物胺的方法，属于食品分析和安全技术领域。本发明包括以下步骤：（1）食品样品中生物胺的提取；（2）生物胺提取液净化；（3）生物胺提取液衍生化；（4）展开剂的优化和薄层层析分析。本发明所提供快速测定食品中生物胺的方法，可用于鱼类、肉类、奶酪、酒类和醋类等产品中生物胺含量的快速测定。与其它分析方法相比，本方法无需昂贵的分析仪器，费用低，操作简便、快捷，能有效降低食品生产流通中的监控成本。

主权项

一种快速测定食品中生物胺的方法，其特征在于步骤为：（1）食品样品中生物胺的提取：取2‑50g食品样品，用水、酸性或有机相介质提取食品样品中生物胺，提取两次，最终用5%的三氯乙酸稀释至100mL；酸性介质选用HCl、HClO4、TCA中的一种，酸性介质的浓度在0.1mol/L‑1mol/L；有机相介质选用甲醇、丙酮、乙腈‑高氯酸、二氯甲烷‑高氯酸中的一种或几种复合； （2）生物胺提取液净化：首先用与提取液等比例的正己烷萃取脱去脂肪，然后进行液‑液萃取；基本步骤：样品液或样品提取液先用盐饱和，然后调 pH 至碱性，最后用有机溶剂萃取，氮气吹干并加入0.1mol/L的盐酸溶解残留物；所述的饱和盐选用NaCl、Na2CO3、Na2SO4中的一种；有机溶剂选用正丁醇、氯仿、异丁醇、异戊醇、乙醚中的一种或几种的复合，有机溶剂的选择和配比必需按照产品的特性进行；（3）生物胺提取液衍生化：将净化后的提取液用衍生剂进行衍生以利于紫外检测，将衍生剂加入到1mL净化后的提取液中，衍生剂与提取液的体积比在1︰20－1︰3之间，在40‑70℃下反应30min，然后加入2mL超纯水，40℃氮气除去配制衍生剂所带入的丙酮，加入6mL乙醚进行萃取，获得的有机相用氮气吹干，加入1mL甲醇，过滤后待用；所述衍生剂选用丹磺酰氯、邻苯二甲醛、苯甲酰氯、9‑芴基甲基‑氯甲酸酯、苯基异硫氰酸盐中的一种； （4）展开剂的优化和薄层层析分析：将待测液点在表面涂有 0.25mm 厚硅胶板上；采用二次展开技术，两种展开系统， 所述两种不同展开系统，第一种是氯仿‑苯‑三乙胺、氯仿‑乙醚‑三乙胺、氯仿‑三乙胺中的一种；第二种系统是苯‑丙酮‑三乙胺、氯仿‑三乙胺、乙醚‑丙酮‑三乙胺中的一种；展开显色应当遵循薄层层析一般操作程序，显色采用碘蒸汽或喷雾显色；也可不显色；显色后于 360nm紫外条件下对色谱板进行观察，以确定样品中是否存在目标生物胺；然后，采用岛津色谱扫描仪在 254nm 条件下对色谱板进行扫描，根据每个斑点的吸光值进行定量计算；所述的涉及的化学品和标准品应当满足GB/T 5009.208‑2008标准。