[发明专利]一种基于位点特异性重组的抗生素生物合成基因簇的克隆方法无效
| 申请号： | 201210508069.6 | 申请日： | 2012-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN103060362A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 张渤;丁晓明;赵国屏 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/66;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海正旦专利代理有限公司 31200 | 代理人： | 陆飞;盛志范 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术和基因工程领域，具体为一种基于位点特异性重组系统实现抗生素生物合成基因簇克隆的方法。本发明是基于链霉菌噬菌体φBT1自身编码的整合酶所介导的位点特异性重组反应，先通过同源重组的方式对抗生素产生菌株进行遗传改造，在靶标基因簇的两端分别插入BAC载体、抗性基因和φBT1整合酶所识别的位点特异性重组位点attB和attP，抽提染色体基因组片段，在φBT1整合酶的作用下于体外使attB和attP位点之间发生位点特异性重组反应，靶标基因簇自身环化，从而实现几十甚至几百kb的大片段抗生素生物合成基因簇的克隆，为生物合成基因簇进一步进行遗传修饰奠定了基础，具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 特异性 重组 抗生素 生物 合成 基因 克隆 方法 | ||
【主权项】：
质粒pZB201，其序列如SEQ ID No. 1所示。
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