[发明专利]一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法

摘要

一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，它涉及一种检测水体中氟含量的方法，本发明是为解决现有的检测水体中氟含量的方法存在的对设施要求高、操作复杂、成本昂贵的技术问题，该检测方法过程如下：一、配置LB液体培养基；二、培养OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液至平台期；三、在含菌液的新鲜LB液体培养基中加入不同含量的氟进行培养；四、通过荧光强度表征细菌生长状况；五、建立菌液发光强度和氟含量的关系曲线和回归方程；六、在含菌液的新鲜LB液体培养基中加入待测水样，检测其荧光强度，计算水样中的氟含量，本发明具有用时少，成本低，准确度、感度高，直观便捷，操作简单等优点，因此广泛应用于环境水质监测领域。

主权项

一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：一、配置LB液体培养基；二、将菌液浓度为106~109cuf/mL的OP50‑GFP大肠杆菌菌株菌液与步骤一的LB液体培养基按体积比为（1~2）：1000混合，在温度为34~40℃的条件下，培养9~11h，至平台期，得到平台期OP50‑GFP大肠杆菌菌株菌液；三、将步骤二得到的平台期OP50‑GFP大肠杆菌菌株菌液与步骤一的LB液体培养基按体积比为1：（90~110）混合，得到检测水体中氟含量的培养菌液；四、将不同氟含量的水样与步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液按体积比为（1~2）：1000分别混合，在温度为34~40℃的条件下，震荡培养4~6h，得到不同浓度的含氟菌液；然后取每个浓度的含氟菌液，在荧光显微镜下进行荧光强度检测，利用图像软件显微分析系统量化荧光强度以表征细菌生长状况，建立菌液荧光强度与氟含量的关系曲线和回归方程y=‑8.6575x+994.36；其中x为含氟水样的氟浓度，y为含氟菌液的荧光强度；不同氟含量的水样中氟浓度分别为0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L；五、取待测水样，加入到步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液中，在温度为34~40℃的条件下，震荡培养4~6h，测量菌液荧光强度，利用步骤四获得的回归方程计算待测水样中的氟含量；其中待测水样的与步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液的体积比（1~2）：1000。