[发明专利]一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法

权利要求书

1.一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、配置LB液体培养基；

二、将菌液浓度为10⁶~10⁹cuf/mL的OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液与步骤一的LB液体培养基按体积比为（1~2）：1000混合，在温度为34~40℃的条件下，培养9~11h，至平台期，得到平台期OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液；

三、将步骤二得到的平台期OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液与步骤一的LB液体培养基按体积比为1：（90~110）混合，得到检测水体中氟含量的培养菌液；

四、将不同氟含量的水样与步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液按体积比为（1~2）：1000分别混合，在温度为34~40℃的条件下，震荡培养4~6h，得到不同浓度的含氟菌液；然后取每个浓度的含氟菌液，在荧光显微镜下进行荧光强度检测，利用图像软件显微分析系统量化荧光强度以表征细菌生长状况，建立菌液荧光强度与氟含量的关系曲线和回归方程y=-8.6575x+994.36；其中x为含氟水样的氟浓度，y为含氟菌液的荧光强度；不同氟含量的水样中氟浓度分别为0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L、20mg/L和50mg/L；

五、取待测水样，加入到步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液中，在温度为34~40℃的条件下，震荡培养4~6h，测量菌液荧光强度，利用步骤四获得的回归方程计算待测水样中的氟含量；其中待测水样的与步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液的体积比（1~2）：1000。

2.权利要求1所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤二中OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液与步骤一的LB液体培养基的体积比为1.5：1000。

3.权利要求1或2所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤二中培养温度为37℃，培养时间为10h。

4.权利要求3所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤三中步骤二得到的平台期OP50-GFP大肠杆菌菌株菌液与LB液体培养基的体积比为1：100。

5.权利要求3所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤四中不同氟含量的水样中的水为蒸馏水。

6.权利要求3所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤四中不同氟含量的水样与步骤三得到的检测水体中氟含量的培养菌液的体积比为1.5：1000。

7.权利要求3所述的一种利用发光细菌检测水体中氟含量的方法，其特征在于步骤四和步骤五中振荡培养的温度条件均为37℃，时间为5h。