[发明专利]用于核酸恒温扩增反应中防止核酸污染和指示其反应结果的方法

摘要

本发明提供了一种用于核酸恒温扩增反应中防止核酸污染和指示反应结果的方法。以LAMP反应为例，用熔点为40-60℃的全精炼石蜡或半精炼石蜡，利用其在LAMP反应温度（60-65℃）时为液态，反应结束后冷却至室温又恢复为固态的原理来防止污染。可通过浊度来判断结果，或通过指示剂来指示恒温扩增反应结果。本发明采用容易配制的特殊熔点蜡块，价格低廉，固态封闭效果好，可永久封闭，从而避免了扩增物受到污染，有效防止核酸恒温扩增反应结果的假阳性，适用于所有核酸恒温扩增反应。

主权项

一种用于核酸恒温扩增反应中防止核酸污染的方法，是将熔点低于核酸恒温扩增反应温度0‑25℃、直径与反应管管径相同的柱状全精炼固态石蜡块或半精炼固态石蜡块加入到反应管中反应液的上方，然后盖上盖，将反应管置于恒温容器进行核酸恒温扩增反应，在反应温度下全精炼固态石蜡块或半精炼固态石蜡块融化成为液态石蜡覆盖在反应液上表面，使反应液在封闭状态下进行反应，反应结束后冷却至室温液态石蜡又恢复为固态，最后用浊度仪对反应液进行结果判读，在整个反应过程中反应液始终与外界隔离，可达到防止核酸污染和避免结果假阳性的目的。