[发明专利]大花型兰花的培育与快速繁殖方法

摘要

本发明是大花型兰花的培育与快速繁殖方法。将碧玉兰、独占春、文山红柱兰及大花蕙兰等兰株在资源圃内进行杂交育种和果实培育，待培育至兰花果实到九成熟，果皮略显黄色时摘取进行杂交育种，经外植体处理、种子无菌萌发培养，种子萌发长出幼根，转接到改良培养基中培养，4～6个月后逐渐成为具有根系并可炼苗和移栽的试管苗；经增殖、分化诱导与生根培养，根长达1cm左右时可出瓶在温室炼苗，1-2个月后在大棚利用设施栽培。本发明的方法不但培育出了新品种，还能进行快速繁殖，以满足“花香色艳”的产业化需求。

主权项

大花型兰花的培育与快速繁殖方法，其特征在于按以下步骤进行：（1）材料：将采得的碧玉兰、独占春、文山红柱兰及大花蕙兰等兰株在资源圃内进行杂交育种和果实培育，待培育至兰花果实到九成熟，果皮略显黄色时摘取；（2）培养方法 ① 选取自然花期接近一致的大花型兰花，待父母本花序1/2花蕾开放时陆续进行授粉育种操作； ② 外植体处理：90%成熟度果实经75%酒精消毒40秒后，转入0.1%氯化汞表面消毒8～12分钟，用无菌水冲洗3～4次，在无菌室取出种子，用纱布包好种子后，以少量无菌水润洗5次，然后用0.1mol/L KOH溶液浸泡8～12分钟，再用无菌水冲洗3次，在饱和漂白粉上清液中消毒10～20分钟，再用无菌水冲洗5次后接种到固体培养基中；③种子无菌萌发培养：筛选出改良MS（即1/2MS）为较适宜的基本培养基，加生长调节剂的配方为：改良MS+6‑BA0.5～3.0mg.L‑1+NAA1.0～1.5mg.L‑1 ，用暗箱培养，温度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小时，培养基 pH5.8； 琼脂7g/L，3个月后发芽；种子萌发后先长出芽，随后长出幼根，转接到改良MS+6‑BA0.3mg.L‑1+NAA0.5mg.L‑1培养基中培养,4～6个月后逐渐成为具有根系并可炼苗和移栽的试管苗；（3）增殖、分化诱导与生根培养① 原球茎增殖培养：种子萌发后，多形成原球茎，可进行增殖培养，培养基及配方是：改良MS + 6‑BA1.0‑3.0 mg.L‑1 + NAA 0.3‑0.8 mg.L‑1，培养30～45天；② 原球茎分化培养：原球茎进行分化培养后能形成试管苗，其培养基及配方为：改良MS + 6‑BA2.0‑3.5 mg.L‑1 + NAA0.3‑0.8 mg.L‑1 + 香蕉泥80g/L，培养35～55天；③ 试管苗生根培养：生根培养配方为：改良MS + 6‑BA0.3‑ 0.8mg.L‑1 + NAA0.5‑2.5 mg.L‑1，通过26～36天诱导出的根长达1cm左右时可出瓶在温室炼苗，1‑2个月后在大棚利用设施栽培；增殖、分化诱导与生根培养条件：增殖、分化诱导与生根培养过程中，均采用光照培养，温度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小时，培养基 pH5.8。