[发明专利]大花型兰花的培育与快速繁殖方法

说明书

 

技术领域

本发明涉及植物培植技术领域，具体地说是大花型兰花新品种的育种与快速繁殖方法。

背景技术

大花型兰花是指兰属（Cmbidium）中大花亚属植物，主要特点是花型较大。兰花花期差异，必须控制花期或保存花粉才能按时授粉。兰花杂交种子很小，内含一些发育不完全的胚，无胚乳，自然状态下很难萌发。虽有人作过兰属植物的育种和种子的萌发研究，但大花型兰花杂交育种和快速繁殖未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种为兰花育种和产业化生产奠定重要技术基础的大花型兰花的育种与快速繁殖方法。

本发明对四种大花型兰花种子进行了无菌萌发研究，成功地培育出大量试管苗。

碧玉兰（Cmbidium  lowianum）、独占春（C. eburneum）、文山红柱兰（C. wenshanense）及大花蕙兰（C.hyridus）是兰科兰属中大花亚属不同种植物，以这四种兰花为亲本培育杂交种兰花，具体的育种与繁殖方法为： 

1、材料来源：兰株采自云南文山、保山、普洱等不同地区，大花蕙兰购置于昆明斗南花卉市场。将采集的野生兰株在温室内栽培驯化，选取花期相近的类型进行杂交育种和果实培育（现有技术），待培育至兰花果实到九成熟，果皮略显黄色时摘取。 

2、培养方法： 

（1）杂交育种：

① 选取自然花期接近一致的大花型兰花，待父母本花序1/2花蕾开放时陆续进行授粉育种操作； 

② 外植体处理：90%成熟度果实经75%酒精消毒40秒后，转入0.1%氯化汞表面消毒8～12分钟，用无菌水冲洗3～4次，在无菌室取出种子，用纱布包好种子后，以少量无菌水润洗5次，然后用0.1mol/L KOH溶液浸泡8～12分钟，再用无菌水冲洗3次，在饱和漂白粉上清液中消毒10～20分钟，再用无菌水冲洗5次后接种到固体培养基中。

（2）种子无菌萌发培养：筛选出改良MS（即1/2MS）为较适宜的基本培养基，加生长调节剂的配方为：改良MS+6-BA0.5～3.0mg.L^-1+NAA1.0～1.5mg.L^-1 ，用暗箱培养，温度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小时，培养基 pH5.8； 琼脂7g/L，3个月后发芽；种子萌发后先长出芽，随后长出幼根，转接到改良MS+6-BA0.3mg.L^-1+NAA0.5mg.L^-1培养基中培养,4～6个月后逐渐成为具有根系并可炼苗和移栽的试管苗；

（3）增殖、分化诱导与生根培养

① 原球茎增殖培养：种子萌发后，多形成原球茎，可进行增殖培养，培养基及配方是：改良MS + 6-BA1.0-3.0 mg.L^-1 + NAA 0.3-0.8 mg.L^-1，培养30～45天；

② 原球茎分化培养：原球茎进行分化培养后能形成试管苗，其培养基及配方为：改良MS + 6-BA2.0-3.5 mg.L^-1 + NAA0.3-0.8 mg.L^-1 + 香蕉泥80g/L，培养35～55天；

③ 试管苗生根培养：生根培养配方为：改良MS + 6-BA0.3- 0.8mg.L^-1 + NAA0.5-2.5 mg.L^-1，通过26～36天诱导出的根长达1cm左右时可出瓶在温室炼苗，1-2个月后在大棚利用设施栽培；

增殖、分化诱导与生根培养条件：增殖、分化诱导与生根培养过程中，均采用光照培养，温度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小时，培养基 pH5.8；

一些种子萌发后经一定时间会直接形成苗，并长出幼根，转接到改良MS+6-BA0.2～0.5mg.L^-1+NAA0.3～0.8mg.L^-1+香蕉泥80gL^-1培养基中培养,4～6个月后逐渐成为具有根系并可炼苗和移栽的试管苗。

本发明的方法具有以下特点：

1、引种驯化：必须引种驯化野生兰花和建立种质资源圃，用能调控环境的温室培育父母本植株以便进行杂交育种。

2、花期调控：用设施按兰花生理生态要求条件下的环境调控使父母本花期一致，或在低温下保存花粉。