[发明专利]RGA法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白生物学活性有效
| 申请号： | 201210195635.2 | 申请日： | 2012-06-14 |
| 公开（公告）号： | CN103293315A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 王军志;饶春明;于雷;王兰;高凯 | 申请（专利权）人： | 中国食品药品检定研究院 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;C12N5/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100050*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 一种新的促胰岛素分泌肽融合蛋白(Exendin-4-HSA，Byetalog)生物活性测定方法。它的基本原理是：将GLP-1R和cAMP反应元件(cAMP response element，CRE)报告基因载体共转染CHO-K1细胞，加压筛选和单克隆分离培养得到稳定单克隆细胞株CHOglplr/crec14。GLP-1R与配体结合后，经过一系列信号转导，激活CRE报告基因萤光素酶的表达，通过检测Byetalog刺激后萤光素酶表达的变化来对Byetalog活性进行定量。具体检测步骤为：CHOglplr/crec14细胞6000个/孔铺96孔板，培养16-18小时，加入不同浓度Byetalog刺激6小时，检测萤光素酶活性。该方法操作简单，反应灵敏，变异性小，对于Byetalog的质量控制和临床应用具有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | rga 检测 胰岛素 分泌 融合 蛋白 生物学 活性 | ||
【主权项】：
一种应用报告基因法(report gene assay，RGA)法检测促胰岛素分泌肽融合蛋白(Byetalog)生物活性的方法，其特征在于：根据GLP‑1受体的作用机制和报告基因的原理，构建GLP‑1反应性转基因细胞株。
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