[发明专利]一种白藜芦醇生物转化菌种筛选、菌种鉴定及利用该菌种进行白藜芦醇生物转化的方法

摘要

一种白藜芦醇生物转化菌种筛选、菌种鉴定及进行白藜芦醇生物转化的方法，筛选方法是将富集培养基加入虎杖浸出液中，封口于28℃、避光、200r/min下震荡培养4d后，将得出转化效率最高的培养液于筛选培养基上做梯度稀释涂板，于28℃下培养，得水解圈培养基，用甲醇提取，经TLC分析和HPLC分析，得到具有高转化能力的菌种S-4。经鉴定，该菌种为卡门培尔青霉。该菌种的培养液具有很强的催化能力，能将白藜芦醇苷完全转化为白藜芦醇，同时菌株利用生成的葡萄糖作为碳源，不具有催化能力的菌种会在生长过程中慢慢消亡。本发明为白藜芦醇的高效、安全及低成本的生产具有重要的意义。

主权项

一种白藜芦醇生物转化菌种的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：1)取打碎的虎杖置于烧杯中，向其中加入去离子水，料液重量体积比为1g/2ml，静置24h，得虎杖浸出液；2)取富集培养基分装至若干个三角烧瓶中，分别标号并加入虎杖浸出液20μL，封口于28℃、避光、200r/min下震荡培养4d后，采用TLC方法检测，得出转化效率最高的培养液；3)将转化效率最高的培养液于筛选培养基上做梯度稀释涂板，于28℃下培养，然后观察是否有能形成水解圈的菌种长出，挑出单菌落重复操作，48h后观察水解圈形成情况；4)取水解圈培养基，用甲醇提取，水解圈培养基/甲醇＝1g/10ml，稀释后进行TLC分析，并对白藜芦醇生成的提取物进行HPLC分析，观察白藜芦醇生成情况，根据得到的水解圈及白藜芦醇生成情况得到具有高转化能力的菌种S‑4。