[发明专利]一种RET融合基因的筛查方法

摘要

本发明属于医药和生物技术领域，涉及RET融合基因的筛查方法，尤其是RET融合基因筛查的多片段引物及其应用。本发明的RET融合基因筛查方法，以样本中的总RNA反转的cDNA为模板，加入核苷酸编码序列如SEQ ID NO 1-10所示的real-time PCR联合引物，进行实时荧光聚合酶链反应，并通过检测反应产物中反应单位间Ct值的差值检验是否具有RET融合基因突变。本发明方法具有操作简捷，节约时间，结果判断直观、明确，成本较低，污染减少的特点。

主权项

一种RET融合基因突变的筛查方法，其特征在于，其包括如下步骤：(1)设计筛查RET融合基因的5对real‑time PCR联合引物或探针；(2)提取样本中的总RNA；(3)以样本中的总RNA为模板，通过逆转录方法合成cDNA；(4)在5个real‑time PCR反应单位中，以(3)中所得的cDNA为模板，分别加入(1)中设计的5对引物或探针，以及包括荧光染料在内的反应预混液；(5)在real‑time PCR反应仪上进行real‑time PCR反应，并分别记录每个样本的10个反应单位的荧光阈值；(6)分别计算引物或探针I～III所在反应体系的荧光阈值的均值CtABP，和引物或探针IV～V所在反应体系的荧光阈值的均值CtBBP；(7)计算ABP与BBP之差的绝对数，判定样本是否具有RET融合基因突变。