[发明专利]利用大肠埃希氏菌BA305发酵生产丁二酸的方法无效
申请号: | 201210142752.2 | 申请日: | 2012-05-10 |
公开(公告)号: | CN102649970A | 公开(公告)日: | 2012-08-29 |
发明(设计)人: | 姜岷;梁丽亚;刘嵘明;马江锋;陈可泉;韦萍 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12P7/46 | 分类号: | C12P7/46;C12R1/19 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 樊文红 |
地址: | 211816 江苏省南京市浦口*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于生物工程技术领域,涉及利用大肠埃希氏菌BA305发酵生产丁二酸的方法。通过提高大肠埃希氏菌BA305对ATP的供给,在两阶段发酵过程中提高丁二酸生产效率,并在循环利用细胞产丁二酸的过程中,保持生产性能,延长丁二酸生产能力。 | ||
搜索关键词: | 利用 大肠 埃希氏菌 ba305 发酵 生产 丁二酸 方法 | ||
【主权项】:
一种利用大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BA305发酵生产丁二酸的方法,其特征在于循环利用重组大肠杆菌细胞生产丁二酸:(1)利用重组大肠杆菌采用两阶段发酵生产丁二酸用LB培养基活化菌体,将大肠埃希氏菌 BA305接种入发酵罐,发酵培养基为LB培养基并添加碳源,通入空气或纯氧进行有氧培养,当有氧培养菌体OD600至0.4~0.6用0.3 mM的IPTG诱导,继续有氧培养15h至OD600=19,停止通入空气或纯氧,通入CO2并添加碳源进行厌氧发酵产酸,同时添加中和剂调控pH值6.4‑6.8;(2)当步骤(1)的培养基中测定无残糖时,两阶段发酵结束;通过无菌离心或无菌膜过滤获得菌体细胞,并将菌体细胞继续加入新鲜LB培养基及碳源,重复厌氧发酵丁二酸的步骤。
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