[发明专利]MEK作为共刺激因子制备一种新型肿瘤疫苗的方法及应用

摘要

本发明涉及生物医学工程、肿瘤免疫学。方法：采患者自体外周血，用MEK作为共刺激因子与细胞因子共同对外周血单核细胞进行体外诱导，制备新型CIK、DC杀伤细胞、解决了患者自身DC细胞体外培养数量不够问题，将DC与肿瘤抗原结合制备出APDC肿瘤疫苗，不仅有治疗作用也有较好的预防作用。制备肿瘤抗原肽：将患者手术切除的肿瘤如：肝癌、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、肠癌等提取mRNA经钴60照射，使其失去致癌性，保持良好的免疫原性；细胞抗原：应用肿瘤传代细胞株，提取mRNA，转染肿瘤抗原，经用钴60照射，用融合的方法将该抗原递呈给杀伤细胞，制备成特异性肿瘤疫苗。该疫苗具有杀伤效果好，安全性高，无毒副作用等特点。

主权项

应用蛋氨酸脑啡肽(Methionine enkephalin，MEK)作为共刺激因子制备一种新型的CIK，DC、APDC肿瘤疫苗。该治疗性疫苗对肿瘤有很好的抑制、杀伤效果，在机体抵御恶性肿瘤中发挥着重要作用。其特征是：MEK被认为是大脑中吗啡受体的内源性配基，它是在免疫细胞中具有特殊活性的淋巴细胞中的抗原和促细胞分裂原活动时产生的。MEK可以提高细胞增殖和IL‑2、IL‑4产量，使mRNA转译得到扩大，而且稳定性也有所提高。MEK作为一种重要的免疫调节信号分子，对自然杀伤细胞、单核细胞、巨噬细胞和细胞因子的释放都有调节作用。应用MEK作为共刺激因子体外诱导DC成熟；以混合培养方式将肿瘤抗原负载丁DC，制备抗原致敏的树突状细胞(Antigen‑presenting dendritic cells，APDC)疫苗，对肿瘤有较好的抑制、杀伤作用。应用MEK对外周血单核细胞进行体外诱导，培养杀伤肿瘤细胞的CIK、DC、APDC具有细胞活性高，数量多，杀伤效果好的特点。治疗途径：根据肿瘤的原发病灶、肿瘤转移的部位等情况选用全身静脉回输、局部胸腔灌注，淋巴结周围注射等多种方法。取得了良好的治疗效果，特别是对晚期肺癌的癌性胸水、心包积液有效率达86.5％。显著提高了患者的生存质量、延长了存活期。