[发明专利]一种生物分子的定量检测方法无效
| 申请号: | 201210067114.9 | 申请日: | 2012-03-14 |
| 公开(公告)号: | CN102653789A | 公开(公告)日: | 2012-09-05 |
| 发明(设计)人: | 刘成辉;李正平;杨朗 | 申请(专利权)人: | 河北大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 石家庄国域专利商标事务所有限公司 13112 | 代理人: | 白海静 |
| 地址: | 071000 *** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种生物分子的定量检测方法,它包括以下步骤:(a)依据靶标生物分子序列,设计荧光标记的H1*和H2*探针;(b)将设定浓度的、标记有荧光基团的茎-环结构核酸探针H1*和H2*溶液分别置于PCR仪上95ºC条件下加热2分钟,然后在室温下避光放置1~2小时,使茎环结构充分闭合;(c)将靶标生物分子配制成设定规格浓度的溶液;取数个离心管,分别加入不同规格浓度的生物分子溶液,同时分别加入H1*、H2*溶液,混合均匀后在室温下进行HCR反应;(d)待HCR反应结束后,根据步骤(b)中H1*和H2*的浓度,加入适量的碳材料,室温反应30分钟后,检测并记录体系的荧光信号;(e)通过荧光信号对靶标生物分子进行定量分析。本发明方法成本低、灵敏度高,且操作简单。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 生物 分子 定量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种生物分子的定量检测方法,其特征在于它包括以下步骤:(a)依据靶标生物分子序列,设计荧光标记的H1*和H2*探针;(b)将设定浓度的、标记有荧光基团的茎‑环结构核酸探针H1*和H2*溶液分别置于PCR仪上95 ºC条件下加热2分钟,然后在室温下避光放置1~2小时,使茎环结构充分闭合;(c)将靶标生物分子用灭菌水或缓冲溶液配制成设定规格浓度的生物分子溶液;取数个离心管,分别在各个管中加入不同规格浓度的生物分子溶液,同时分别加入b步所制备的H1*、H2*溶液,混合均匀后在室温下进行HCR反应;(d)待HCR反应结束后,根据步骤(b)中H1*和H2*的浓度,每个离心管中加入适量的碳材料,使碳材料的用量刚好能够完全猝灭初始浓度H1*和H2*单体的荧光信号,室温反应30分钟后,检测并记录体系的荧光信号;(e)通过荧光信号对靶标生物分子进行定量分析。
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