[发明专利]一种蛋清抗氧化肽及其制备方法

摘要

本发明公开一种蛋清抗氧化肽的制作方法。主要以鸡蛋蛋清粉为原料，经热变性、酶解、超滤、离子交换、凝胶过滤、真空浓缩干燥等工艺分离纯化得到高活性的蛋清抗氧化肽。本方法用碱性蛋白酶将鸡蛋清酶解，分离得到低分子量、具高抗氧化活性的蛋清酶解肽，除降低蛋白的抗原性，改善其功能特性，且更利于吸收外，该产品还可抑制和清除自由基，调整和改善生理功能，可应用于研制预防和治疗慢性疾病药物。为提高蛋清蛋白附加值、鸡蛋深加工及应用开辟新途径，市场开发前景广阔。

主权项

一种蛋清抗氧化肽的制备方法，其特征在于其方法包括：①蛋清酶解液制备将蛋清粉溶于磷酸盐缓冲液中配制成蛋清液，蛋清液热变性后冷却；再按10000U/g蛋白的比例向上述蛋清液中加入碱性蛋白酶，并用磷酸盐缓冲液稀释上述蛋清液浓度至8～12mg/mL，置于45～55℃反应4～6h；再于沸水浴中灭酶，离心取上清液，即为蛋清酶解液；其中，上述磷酸盐缓冲液为0.05mol/L、pH8.0；②超滤超滤分离步骤①获得的蛋清酶解液，收集分子量＜3k Da的组分，浓缩；③DEAE‑52离子柱层析由步骤②获得的产物，经DEAE‑52离子柱层析，依次以0.00、0.02、0.05、0.10、0.20mol/L NaCl溶液进行梯度洗脱，根据280nm处的吸光值图谱，分别收集洗脱下来的各蛋白峰对应的组分，收集以0.02mol/L NaCl溶液作为洗脱液的蛋白峰，浓缩；④Sephadex G‑25凝胶柱层析步骤③所得的产物，经Sephadex G‑25凝胶柱层析，洗脱液为蒸馏水，根据280nm处的吸光值图谱，分别收集洗脱下来的各蛋白峰对应的组分，其中平均分子量为273Da的蛋白峰为蛋清抗氧化肽。