[发明专利]一种产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法有效
申请号: | 201210032146.5 | 申请日: | 2012-02-14 |
公开(公告)号: | CN102586146A | 公开(公告)日: | 2012-07-18 |
发明(设计)人: | 夏焕章;倪现朴;李昊 | 申请(专利权)人: | 沈阳药科大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/09;C12N15/63;C12P19/50;C12R1/01 |
代理公司: | 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 | 代理人: | 李宇彤 |
地址: | 110016 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明属于医药技术领域,涉及一种主要产生庆大霉素C1a的工程菌及其构建方法,是利用基因阻断技术对庆大霉素产生菌棘孢小单孢菌中的6’-C-甲基转移酶基因gntK进行破坏,以阻断庆大霉素C1,C2和C2a的合成,使其主要产生庆大霉素C1a和少部分的庆大霉素C2b。原始菌株中C1a,C2,C2a和C1的含量分别为6.5%,45.3%,20.1%和27.1%,而阻断株中的C1a和C2b的含量分别为94.0%和6.0%。本发明通过框架内删除失活的方法破坏棘孢小单孢菌中gntK基因,包括gntK基因阻断质粒的构建,阻断质粒转化棘孢小单孢菌,双交换菌株的筛选以及发酵产物的分析。本发明所构建的工程菌,不含有任何抗性标记,通过连续传代,庆大霉素C1a产量非常稳定。 | ||
搜索关键词: | 一种 产生 庆大霉素 c1a 工程 及其 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种基因工程菌,其特征是,该菌株主要产生庆大霉素C1a组分,将该基因工程菌命名为Micromonospora purpurea gntK‑,其保藏编号为:CGMCC NO.4838。
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