[发明专利]一种快速筛检动物食品样中抗菌药物残留的检测方法

摘要

本发明公开了一种快速筛检动物食品样中抗菌药物残留的检测方法，它包括菌株活化，菌悬液制备，检测管制备，样品前处理，样品检测；利用抗菌药物能抑制对它敏感的细菌生长或繁殖的原理，吸取待检样品加入检测管中，培养一定时间，根据检测管内培养基颜色的变化判断样品中是否含有抗菌药物残留。与现有技术比较，本发明保持了TTC检测法可靠性的基础上解决了该方法中的食品样品中固有微生物或杂菌干扰所造成的假阳性、假阴性结果的问题；具有检测方法简单、干扰小、灵敏度高、准确度高等特点，适用于动物食品样品中抗菌药物残留的高通量快速筛选检测。

主权项

一种快速筛检动物食品样品中青霉素残留的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)菌株活化：将短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)LJM‑006菌株，保藏编号为CGMCC No.5418，接种于营养琼脂斜面培养基上，调节该培养基的pH值至6.8～7.2，于35～37℃下进行优化培养，并进行转种继代培养；(2)菌悬液制备：取步骤(1)所得短双歧杆菌接种于营养琼脂斜面培养基，35±2℃厌氧培养24小时，用灭菌生理盐水将菌苔洗下，制成悬液，调整其OD600值至0.25～0.35，置2‑8℃冰箱中保存；(3)检测管制备：以重量计，取蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，K2HPO4 2g，MgSO4·7H2O 0.5g，MnSO4·4H2O 0.2g，低聚果糖3g，柠檬酸二铵2g，吐温‑80 1mL，蒸馏水1L，加热溶解校正pH值至6.5，115℃高压灭菌15‑20分钟，冷却温度为50～65℃，并迅速取出10mL液体并混合步骤(2)所制备的菌悬液，注入10ml试管内，作为测试待用；(4)样品前处理：取待检的动物食品样品匀浆组织5g，用无菌1％磷酸盐缓冲液20mL稀释，漩涡混匀，于80℃水浴加热5min，冷却后于5，000r/min离心15min，取上清液作为供试样品液；(5)样品检测：参照TTC法，检验动物食品中青霉素的残留量，取步骤(4)所得供试样品液20～100μL加到步骤(3)所制备检测管中，密闭封口后于35±2℃厌氧培养8～10小时，加TTC0.3mL，36±1℃水浴培养30min，根据显色状态判定试验结果：检测样品呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。