[发明专利]一种快速筛检动物食品样中抗菌药物残留的检测方法

权利要求书

1.一种快速筛检动物食品样品中青霉素残留的检测方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)菌株活化：将短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)LJM-006菌株，保藏编号为CGMCC No.5418，接种于营养琼脂斜面培养基上，调节该培养基的pH值至6.8～7.2，于35～37℃下进行优化培养，并进行转种继代培养；

(2)菌悬液制备：取步骤(1)所得短双歧杆菌接种于营养琼脂斜面培养基，35±2℃厌氧培养24小时，用灭菌生理盐水将菌苔洗下，制成悬液，调整其OD₆₀₀值至0.25～0.35，置2-8℃冰箱中保存；

(3)检测管制备：以重量计，取蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸钠5g，K₂HPO₄ 2g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，MnSO₄·4H₂O 0.2g，低聚果糖3g，柠檬酸二铵2g，吐温-80 1mL，蒸馏水1L，加热溶解校正pH值至6.5，115℃高压灭菌15-20分钟，冷却温度为50～65℃，并迅速取出10mL液体并混合步骤(2)所制备的菌悬液，注入10ml试管内，作为测试待用；

(4)样品前处理：取待检的动物食品样品匀浆组织5g，用无菌1％磷酸盐缓冲液20mL稀释，漩涡混匀，于80℃水浴加热5min，冷却后于5，000r/min离心15min，取上清液作为供试样品液；

(5)样品检测：参照TTC法，检验动物食品中青霉素的残留量，取步骤(4)所得供试样品液20～100μL加到步骤(3)所制备检测管中，密闭封口后于35±2℃厌氧培养8～10小时，加TTC0.3mL，36±1℃水浴培养30min，根据显色状态判定试验结果：检测样品呈乳的原色时为阳性，呈红色为阴性。