[发明专利]一种芒属植物芒荻杂种9号体胚组培快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种芒属植物芒荻杂种9号体胚组培快速繁殖方法，其步骤：A、幼穗选取：选取芒荻杂种9号处于颖花原基形成期的幼穗；B、用初代诱导培养基诱导：剪成小段，用酒精消毒，然后用氯化汞浸泡，无菌水冲洗，将其接种在幼穗的初代诱导培养基上，初代诱导，获得胚性愈伤；C、用生苗培养基继代培养：所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗；D、用生根诱导培养基生根诱导：所生幼苗在诱导培养基上诱导生根；E、驯化移栽：在温室内，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，移栽到苗圃中，光照，获得了芒荻杂种9号的幼苗。方法易行，操作简便，且分化出愈率和成苗率很高，成活率高，适用于芒荻杂种9号种苗产业化生产的快速扩繁。

主权项

一种芒属植物芒荻杂种9号体胚组培快速繁殖方法，其步骤是：A、幼穗选取：选取芒荻杂种9号处于颖花原基形成期的幼穗；B、用初代诱导培养基诱导：将其剪成2‑3厘米小段，先用75%体积比酒精消毒25‑35s，然后用0.1%质量体积比的氯化汞浸泡3‑5min，再用无菌水冲洗2‑4次，将其接种在幼穗的初代诱导培养基上，经过28‑30天的初代诱导，获得胚性愈伤，培养条件为24‑28℃，暗培养，初代诱导培养基为：A：MS培养基附加激动素KT1‑2mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D3‑5mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L，或B：MS培养基附加激动素KT3‑4mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D1‑3mg/L，六水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L；C、用生苗培养基继代培养：所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗，25‑30天继代一次，增殖系数为3‑4，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16个小时，光强为2000LX，所述的生苗培养基配方为：A：MS培养基附加激动素KT1‑2mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D 0.1‑1mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L，或B：MS培养基附加6‑苄氨基腺嘌呤6‑BA1‑2mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D1‑2mg/L，六水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L，将胚性愈伤转到其中一种生苗培养基之后4‑6天，愈伤开始转绿，8‑12天开始分化出芽，15‑20天形成小幼苗；D、用生根诱导培养基生根诱导：所生幼苗在生根诱导培养基上诱导生根，培养25‑30天，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16个小时，光强为2000LX，生根诱导培养基为：A：1/2 MS培养基附加2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D0.5‑2mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L，或B：MS培养基附加激动素KT1‑3mg/L，2,4二氯苯氧乙酸2,4‑D0.5‑2mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR3g/L，将长到5‑10厘米的幼苗转到任意一种生根培养基上，5天幼苗就会分化出白色或黄色的根；E、驯化移栽：在温室内，将生长健壮的、株高在5‑6厘米的组培苗移栽到由沙土组成的驯化苗圃中驯化，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，15‑20d后，视幼苗长势，移栽到苗圃中，温室条件为15℃‑25℃，照明使用卤光，光照14‑16个小时，光照强度为2000LX，获得了芒荻杂种9号的幼苗。