[发明专利]一种芒属植物芒荻杂种9号体胚组培快速繁殖方法有效
| 申请号: | 201110451887.2 | 申请日: | 2011-12-29 |
| 公开(公告)号: | CN102524068A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
| 发明(设计)人: | 胡中立;赵玲玲;胡晖;占红良;刁英;周发松 | 申请(专利权)人: | 湖北光芒能源植物有限公司 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 王敏锋 |
| 地址: | 430074 湖北省武汉市东*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 植物 杂种 号体胚组培 快速 繁殖 方法 | ||
1.一种芒属植物芒荻杂种9号体胚组培快速繁殖方法,其步骤是:
A、幼穗选取:选取芒荻杂种9号处于颖花原基形成期的幼穗;
B、用初代诱导培养基诱导:将其剪成2-3厘米小段,先用75%体积比酒精消毒25-35s,然后用0.1%质量体积比的氯化汞浸泡3-5min,再用无菌水冲洗2-4次,将其接种在幼穗的初代诱导培养基上,经过28-30天的初代诱导,获得胚性愈伤,培养条件为24-28℃,暗培养,初代诱导培养基为:A:MS培养基附加激动素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D3-5mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L,或B:MS培养基附加激动素KT3-4mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D1-3mg/L,六水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L;
C、用生苗培养基继代培养:所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗,25-30天继代一次,增殖系数为3-4,培养条件为24-28℃,每天光照14-16个小时,光强为2000LX,所述的生苗培养基配方为:A:MS培养基附加激动素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D 0.1-1mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L,或B:MS培养基附加6-苄氨基腺嘌呤6-BA1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D1-2mg/L,六水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L,将胚性愈伤转到其中一种生苗培养基之后4-6天,愈伤开始转绿,8-12天开始分化出芽,15-20天形成小幼苗;
D、用生根诱导培养基生根诱导:所生幼苗在生根诱导培养基上诱导生根,培养25-30天,培养条件为24-28℃,每天光照14-16个小时,光强为2000LX,生根诱导培养基为:A:1/2 MS培养基附加2,4二氯苯氧乙酸2,4-D0.5-2mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L,或B:MS培养基附加激动素KT1-3mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D0.5-2mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR3g/L,将长到5-10厘米的幼苗转到任意一种生根培养基上,5天幼苗就会分化出白色或黄色的根;
E、驯化移栽:在温室内,将生长健壮的、株高在5-6厘米的组培苗移栽到由沙土组成的驯化苗圃中驯化,每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水,15-20d后,视幼苗长势,移栽到苗圃中,温室条件为15℃-25℃,照明使用卤光,光照14-16个小时,光照强度为2000LX,获得了芒荻杂种9号的幼苗。
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