[发明专利]一种从玉米蛋白粉中制备活性多肽的方法

摘要

本发明涉及一种从玉米蛋白粉中制备活性多肽的方法，以玉米蛋白粉为原料，首先进行脱脂处理，然后提取醇溶蛋白，再以醇溶蛋白为底物，利用蛋白酶解方法在优化条件下进行水解，水解产物经一系列分离纯化手段，获得了一类玉米来源的活性肽。本发明的方法涉及生产工艺简单，反应条件温和，对生产设备的要求低，适合工业化大生产。

主权项

一种从玉米蛋白粉中制备活性多肽的方法，包括如下步骤：（1）取玉米蛋白粉，用12‑16倍量的水洗，搅拌，1500rpm离心10min，反复水洗2～3次，收集沉淀，‑45℃冷冻干燥玉米蛋白粉，粉碎后过100目筛，加入质量分数8%的NaHCO3溶液，固液比为1：8，放入恒温水浴振荡锅中，40℃振荡20min，5000rpm离心10min，得脱脂玉米蛋白粉；（2）在脱脂玉米蛋白粉中加入占其重量0.2%的焦亚硫酸钠，再加入体积分数95%的乙醇，使固液比1：10，70～80℃水浴30min后，调节pH值至9.0，加水使乙醇体积分数为60%，萃取30min，3000 rpm离心5 min，取上清液，用质量分数1%氯化钠1：1盐析，静置12 h后，离心，收集沉淀，反复水洗2～3次，‑45℃冷冻干燥，得玉米醇溶蛋白粉；（3）在干燥玉米醇溶蛋白粉中加水使固液比1：12，放入50～60℃恒温水浴振荡锅中，按干燥玉米醇溶蛋白粉重量的4%加入预先在50℃保温的木瓜蛋白酶，维持pH=7，水解80～100min，然后用质量分数10%的NaOH溶液调pH=8，按干燥玉米醇溶蛋白粉重量的7%加入预先在50℃保温的Alcalase蛋白酶，通过滴加0.5M的NaOH溶液维持pH=8，水解240‑280min，快速升温至95℃、10～15min，水解液冷却到常温后，调pH=7，15000rpm/min、15min离心，取上清液，得粗制玉米肽液；（4）粗制玉米肽液经滤纸过滤，再经纸浆过滤，然后依次经过10K、5K和2K超滤膜包，最后将最终滤液在‑45℃真空冷冻干燥，得玉米活性多肽。