[发明专利]一种简便、高效诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子的方法

摘要

本发明涉及一种简便、高效诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子的方法。该方法将辣椒疫霉菌培养于黑麦琼脂培养基平板上，置于28℃光照生化培养箱中培养，待菌丝长满整个平板后，以无菌L型玻棒涂抹长满菌丝的培养基平板，再置于28℃光照生化培养箱中培养24h以诱导孢子囊的产生，再将已产生孢子囊的培养基平板加入18mL的无菌水后移至4℃冰箱中1h，以促进游动孢子分化，然后再取出放置28℃生化培养箱中1h，使游动孢子同时大量释放，以利收集大量游动孢子悬浮液。本发明为实现在短时间内诱导辣椒疫霉菌产生大量游动孢子提供了保证，本发明具有简易、高效、无杂菌污染的优点，对于开展辣椒疫病的研究具有重大意义。

主权项

一种简便、高效诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子的方法，其特征和步聚如下：（1）辣椒疫霉菌菌丝体的培养：将辣椒疫霉菌菌丝块接种于黑麦培养基平板上，置于500‑600勒克斯的白色日光灯下连续光照的25℃‑28℃培养箱中培养；（2）辣椒疫霉菌菌丝体的抹伤： 待步聚（1）菌丝长满整个平板后，以无菌的L型玻棒涂抹长满菌丝的平板；（3）辣椒疫霉菌孢子囊的诱导：将步骤（2）得到的平板放置于500‑600勒克斯的白色日光灯下连续光照的28℃生化培养箱中培养24‑36h；（4）游动孢子的释放：在步骤（3）得到的平板中加入无菌水，移至4℃冰箱或生化培养箱中静置1‑2h，然后再置于28℃生化培养箱中孵育1‑2h；（5）辣椒疫霉菌游动孢子的收集：用灭过菌的毛笔轻轻拨动步骤（4）得到的培养基平板表面的菌丝，以达到刷洗游动孢子的目的，双层无菌纱布过滤，所得到的过滤液即为辣椒疫霉菌游动孢子悬浮液。