[发明专利]一种DAHP合酶的异源可溶性表达方法及其重组载体和基因工程菌无效
| 申请号： | 201110368962.9 | 申请日： | 2011-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN102505023A | 公开（公告）日： | 2012-06-20 |
| 发明（设计）人： | 花强;韦柳静;马娜;范宇翔;刘念念;周燕;张婕;李婷兰 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N1/21;C12N9/10;C12Q1/48;C12R1/19;C12R1/01 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 朱水平;沈利 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种由珍贵橙色束丝放线菌(Actinosynenma pretiosun)aroF基因编码的DAHP合酶的异源可溶性表达方法及所用的重组载体和基因表达工程菌。该方法通过将aroF基因连接到表达载体上形成重组表达载体，并将之转化到已含有编码分子伴侣蛋白GroEL/GroES的质粒pGro7的大肠杆菌中，诱导表达后可得到可溶性的具有酶活性的DAHP合酶，之后进行分离纯化和酶活检测。本发明首次实现了珍贵橙色束丝放线菌DAHP合酶的异源可溶性表达并得到纯化的DAHP合酶；分离纯化和酶活检测的方法较之前有了较大改进。本发明对于研究珍贵橙色束丝放线菌(A.pretiosum)的莽草酸合成途径和氨基莽草酸途径有着重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 dahp 可溶性 表达 方法 及其 重组 载体 基因工程 | ||
【主权项】：
一种外源基因在大肠杆菌中异源可溶性表达的方法，其特征在于，其包括以下步骤，构建表达重组外源蛋白的表达载体，该重组表达载体与表达分子伴侣GroEL/GroES的载体共同转入大肠杆菌表达菌株中从而获得可溶性表达外源蛋白的大肠杆菌基因表达工程菌，进行共表达。
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