[发明专利]用于被修饰蛋白分离鉴定的电泳分析方法有效
| 申请号： | 201110299468.1 | 申请日： | 2011-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN102445487A | 公开（公告）日： | 2012-05-09 |
| 发明（设计）人： | 陈红兵;简珊;吴志华;佟平;高金燕;李欣;杨安树 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 一种用于被修饰蛋白分离鉴定的电泳分析方法，其特征是通过以下步骤实现：1）配置凝胶及缓冲液：a）凝胶溶液：6-8M尿素，4-8%的丙烯酰胺，其中丙烯酰胺中Acr：Bis=30-40:1，20mMEDTA，90mM的pH8.4的Tris-硼酸以及AP、双蒸水、TEMED；b）上样缓冲液：35-50%的蔗糖、6-8M尿素、20mMEDTA以及90mM的pH8.4的Tris-硼酸；c）电极缓冲液：25mMEDTA、112.5mM的pH8.4的Tris-硼酸;2）电泳电压100-180V，时间4-6h，凝胶板长度50-200mm，常规冷却，60℃以下；3）凝胶经染色，脱色后成像，对照未修饰蛋白，判断出修饰蛋白的条带，或通过QualityOne软件定量出蛋白被修饰的程度。本发明步骤简单，操作方便，电泳分离效果明显，还可以分析出天然蛋白被修饰的程度。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 修饰 蛋白 分离 鉴定 电泳 分析 方法 | ||
【主权项】：
一种用于被修饰蛋白分离鉴定的电泳分析方法，其特征是通过以下步骤实现：1）配置凝胶及缓冲液：a）凝胶溶液：6‑8 M尿素，4‑8%的丙烯酰胺，其中丙烯酰胺中丙烯酰胺：N，N‑甲叉双丙烯聚酰胺= 30‑40:1，20mM乙二胺四乙酸，90mM的 pH=8.4的三羟甲基氨基甲烷‑硼酸以及过硫酸铵、双蒸水、四甲基乙二胺；b）上样缓冲液：35‑50%的蔗糖、6‑8M尿素、20mM 乙二胺四乙酸以及90mM的pH8.4的三羟甲基氨基甲烷‑硼酸；c）电极缓冲液：25mM乙二胺四乙酸、112.5mM的pH8.4的三羟甲基氨基甲烷‑硼酸；2）电泳：电泳条件为电压100‑180 V，电泳时间4‑6小时，凝胶板长度为50‑200mm；电泳时采用常规方法冷却，电泳温度控制在60℃以下；3）蛋白质分离及修饰的判定：电泳后凝胶经染色，脱色后成像，对照未修饰蛋白，判断出修饰蛋白的条带，或通过Quality One软件定量出蛋白被修饰的程度。
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