[发明专利]一种从鸭肌肉中分离磷脂绑定蛋白的方法

摘要

一种从鸭肌肉中分离磷脂绑定蛋白纯品的方法，属于农产品加工技术领域，该方法从鸭肌肉中提取磷脂绑定蛋白，首先进行粗蛋白提取，然后使用离子交换层析对磷脂绑定蛋白进行纯化，获得的磷脂绑定蛋白分子量约为90KD。本发明具有纯化方法快速简洁和所得蛋白对磷脂的绑定能力强的特点，在医药、食品、生化等领域具有广泛的应用前景。

主权项

一种从鸭肌肉中分离磷脂绑定蛋白的方法，包括以下步骤：1）鸭肌肉组织剁碎后加入Tris HCl缓冲液中匀浆，将浆液静止1小时；2）将浆液离心，取上清液，在上清液中加入75%饱和度的硫酸铵进行盐析，然后离心，将沉淀物用Tris HCl缓冲液溶解，取得混合溶液；3）将混合溶液置于透析袋中，在Tris HCl缓冲液中进行去盐透析，取得去盐的透析物；4）将去盐的透析物离心去除变性蛋白，取得磷脂绑定蛋白粗品；5）将磷脂绑定蛋白粗品纯化后，得磷脂绑定蛋白纯品；其特征在于：所述步骤5）中纯化方法是：采用source 15Q、10cm×1.0cm的离子交换柱，用pH为7.5、浓度为50mmol/L、流速为0.2mL/min 的Tris HCl缓冲液平衡，待紫外吸收和电导基线稳定后，再用pH为7.5、含1.5mol/LNaCl的Tris HCl缓冲液进行线性洗脱，控制NaCl的Tris HCl缓冲液进入离子交换柱的流速为1.5mL/min，开始收集滤出液，当滤出液的NaCl浓度达到100%时停止收集；将收集的滤出液进行超滤浓缩，取得磷脂绑定蛋白纯品。