[发明专利]PLGA猪流感DNA疫苗微球的制备方法

摘要

PLGA猪流感DNA疫苗微球的制备方法，它涉及DNA疫苗微球的制备方法。它解决了现在猪流感DNA疫苗存在持续时间短，在体内易被降解，不能缓释的问题。方法：一、PLGA溶于二氯甲烷中，加猪流感病毒H3N2亚型HA基因重组质粒DNA溶液，乳化后加聚乙烯醇，得复乳；二、复乳磁力搅拌后离心，收集微球并洗涤，再真空冷冻干燥即完成。本发明制备的PLGA猪流感DNA疫苗微球大小均匀，外形圆整，表面光滑，粒径为6.08±2.34μm，包封率平均为60％±3.8％，载药量平均为5.5％±0.5％；在保证DNA疫苗稳定性的条件下具有较高的包封率，可以保持体内最佳的药物浓度，延长药物作用时间，实现了药物的缓释。

主权项

PLGA猪流感DNA疫苗微球的制备方法，其特征在于PLGA猪流感DNA疫苗微球的制备方法按以下步骤制备：一、称取25mg的PLGA溶于0.75mL的二氯甲烷中，待完全溶解后加入40μl猪流感病毒H3N2亚型HA基因重组质粒DNA溶液，冰浴条件下超声乳化10s，得初乳，然后在转速为7000r/min的条件下加入20mL质量浓度为2％的聚乙烯醇，得复乳；二、复乳在转速为200r/min的条件下磁力搅拌5h，然后在转速为4000r/min的条件下离心10min，收集微球并用灭菌水洗涤3次，再置于‑10～‑50℃的条件下真空冷冻干燥，即完成PLGA猪流感DNA疫苗微球的制备；其中步骤一40μl猪流感病毒H3N2亚型HA基因重组质粒DNA溶液中有2mg猪流感病毒H3N2亚型HA基因重组质粒DNA；步骤一中猪流感病毒H3N2亚型HA基因重组质粒DNA的浓度为120μg/mL。