[发明专利]一种磁性多孔聚合物固定化脂肪酶制备1, 3-甘油二酯的方法

摘要

本发明公开了一种磁性多孔聚合物固定化脂肪酶制备1,3-甘油二酯的方法，包括如下步骤：1)以二价和三价铁盐的混合物共沉淀制备超顺磁性Fe3O4内核，以表面活性剂包覆，并在微粒外表进行悬浮聚合制备多孔聚合物壳层，从而得到磁性多孔聚合物微球载体；2)加入脂肪酶酶溶液，搅拌、洗涤、干燥得到固定化酶；3)采用该固定化酶催化甘油与脂肪酸的酯化反应，得到1,3-甘油二酯。本发明所涉及的固定化脂肪酶在1,3-甘油二酯的合成反应中，活力、操作稳定、区域选择性均显著提高，酶的回收利用操作极大简化，产品纯度高且不含有害溶剂。

主权项

1.一种磁性多孔聚合物固定化脂肪酶制备1,3-甘油二酯的方法，其特征在于包括如下步骤：1)向200mL无氧水中加入0.20~0.30mol三价铁盐和0.10~0.15mol二价铁盐，超声处理20~30min；升温至65~90℃，在800~1200rpm搅拌下，N₂鼓泡20~30min，加入7.5~10mL质量分数25~28%的氨水或10~15mL10mol/LNaOH，15~30min后，磁分离，无氧水洗涤至pH=7；2）加入4.5~9mL表面活性剂混合，65~90℃、800~1200rpm搅拌1~2h，用甲苯洗涤3~5次，加入2~15mL甲苯混合形成磁流体；3）取70mL的质量比为4~6:3~5:200的NaCl、聚乙烯醇和水，及10mL的质量比为6~7:1:0.17~0.20的疏水性单体、交联剂和环己烷，加入2~15mL磁流体混合，超声处理5~15min，N₂鼓泡、800~1200rpm搅拌10~15min，升温至72~77℃并加入引发剂引发聚合，回流3.5~7h，磁分离，用甲醇洗涤3~5次，真空干燥，得到磁性多孔聚合物微球载体；4)将含有10~50mg脂肪酶的水溶液与10~50mg磁性多孔聚合物微球载体混合，0~4℃、180~220rpm搅拌5~12h，磁分离，冻干8~12h，得到磁性多孔聚合物固定化脂肪酶；5)将40~100mg甘油和200~500mg脂肪酸与10~35mg4分子筛、10~50mg脂肪酶混合，在30~40℃、180~220rpm搅拌下反应7~24h，得到1,3-甘油二酯。