[发明专利]一种鸡胚培养及活体电转基因方法无效
| 申请号： | 201110241537.3 | 申请日： | 2011-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN102321570A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 林俊堂;杨慈清;王聪睿;毛会丽;李小英;石晓卫 | 申请（专利权）人： | 新乡医学院 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073;C12N15/89;C12N13/00 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 陈浩;牛爱周 |
| 地址： | 453003*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种鸡胚培养及活体电转基因方法，包括以下步骤：带壳培养，培养2天—3天时分别做带壳原位电转基因；去壳培养，将受精鸡蛋培养到第3天时，去壳置培养器皿放入恒温恒湿培养箱中培养；原位电转基因步骤，带壳培养2-3天将0.5μg/μl的质粒0.5-1μl用显微注射毛细玻璃针在体视显微镜下注射到脊髓或去壳培养5-6天注射到视顶部位，将电极放在已注射质粒的脊髓或视顶部位两侧，阳性电极在拟转基因一侧，进行电转；然后进行组织取材、包埋和切片。通过对传统培养方法的优化，建立鸡胚胎带壳和去壳培养技术，提高鸡胚培养成活率，为鸡胚活体原位电转基因提供了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 培养 活体 转基因 方法 | ||
【主权项】：
一种鸡胚培养及活体电转基因方法，其特征在于：包括以下步骤：带壳培养，培养2—3天时分别做带壳原位电转基因；去壳培养，将受精鸡蛋培养到第3天时，去壳置培养器皿放入恒温恒湿培养箱中培养；原位电转基因步骤，带壳培养2—3天将0.5μg/μl的质粒0.5—1μl用显微注射毛细玻璃针在体视显微镜下注射到脊髓或去壳培养5—6天注射到视顶部位，将电极放在已注射质粒的脊髓或视顶部位两侧，阳性电极在拟转基因一侧，进行电转；然后进行组织取材、包埋和切片。
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