[发明专利]ZnSe量子点标记牛血清蛋白荧光探针的制备方法

摘要

本发明公开了一种ZnSe量子点标记牛血清蛋白荧光探针的制备方法，其步骤：A、制备KH4Se溶液：通过硼氢化钾还原硒粉制备；B、分别称取硼氢化钾和硒粉于具塞试管中，向其中加入高纯水，塞上塞子，得无色透明液体，为硒氢化钾；C、称取醋酸锌晶体和还原型谷胱甘肽，溶解于无氧高纯水中；D、在搅拌和不断通入高纯氩气的条件下，加入硒氢化钾，用氢氧化钠溶液调节pH值，待其混合；E、分装于聚四氟乙烯消解罐中，加热，KH4Se、Zn(Ac)2·2H2O，还原型谷胱甘肽的摩尔比率；F、取ZnSe量子点，牛血清蛋白，加入乙基[3-(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐于恒温振荡，得量子点标记牛血清蛋白荧光探针。工艺简单，易控制；具有很好的生物相容性和检测性能，能很好地进行荧光检测。

主权项

一种ZnSe量子点标记牛血清蛋白荧光探针的制备方法，其步骤是：A、制备硒氢化钾溶液：通过硼氢化钠还原碲粉制备，反应方程式如下：            4KBH4 + 2Se + 7H2O → 2KH4Se + K2B4O7 +11H2↑B、 分别称取0.03006g硼氢化钾和0.00789g硒粉粉于具塞试管中，向其中加入2mL高纯水，塞上塞子，于1~5℃下反应0.5~1.5h，得无色透明液体，为0.05mol/L的硒氢化钾；C、分别称取0.10975~0.16463g醋酸锌晶体和0.24586~0.41489g还原型谷胱甘肽，溶解于200mL无氧高纯水中；D、在150~300转/min的搅拌和不断通入高纯氩气的条件下，加入1mL0.05mol/L的硒氢化钾，用5mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液pH值为10‑11，待其混合；E、以每罐50mL分装于聚四氟乙烯消解罐中，于93‑97℃下微波加热60~75min，KH4Se、Zn(Ac)2·2H2O，还原型谷胱甘肽的摩尔比率分别为 1/15~1/10：1：1.6~1.8；F、取1mL制备好的浓度为1 mmol/L ZnSe量子点，1mL配制好的1×10‑5mol/L的牛血清蛋白溶液，再加入0.2mL0.24g/L的乙基[3‑(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐于40℃恒温振荡1‑1.5h，使ZnSe量子点通过偶联剂乙基[3‑(二甲胺基)丙基]碳二亚胺盐酸盐与牛血清蛋白溶液进行充分反应，加入0.3mL、0.1mol/L的2‑巯基乙醇终止交联，制得量子点标记牛血清蛋白荧光探针。