[发明专利]用双指示线免疫层析半定量诊断癌胚抗原的方法

摘要

本发明公开了一种生物工程技术领域的检测方法，具体是一种用双指示线免疫层析半定量诊断癌胚抗原的方法。癌胚抗原是一个广谱性肿瘤标志物，它能向人们反映出多种肿瘤的存在，对大肠癌、乳腺癌和肺癌的疗效判断、病情发展、监测和预后估计，是一个较好的肿瘤标志物。临床上对CEA的检测常作为结肠癌、胃癌、直肠癌、食道癌等早期辅助诊断及癌症术后有无复发的检测指标。目前，临床上常用的CEA检测的方法为ELISA，CLIA等方法。上述方法费时、费力、不利于普及而且费用昂贵。免疫胶体金技术近年来发展迅速，得到了广泛应用，如传染病、早孕、癌症等的检测。本发明采用胶体金免疫层析法，建立快速检测CEA的方法，并且能够半定量检测5ng/mL～20ng/mL这一CEA灰区范围，测定CEA可以作为良性与恶性肿瘤的鉴别诊断依据。

主权项

一种用双指示线免疫层析半定量诊断癌胚抗原的方法，其特征在于，采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗CEA单克隆抗体1并均匀涂布于胶体金垫上，作为示踪标记物。在硝酸纤维素膜上，两个不同浓度的CEA单克隆抗体2固定于两个检测线(即T线)，羊抗鼠二抗固定于质控线(即C线)。依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中。金标抗体与相应的抗原、抗体发生特异性结合被截留而显色，根据T线、C线显色与否来判断阴阳性结果。