[发明专利]用于多种细菌的基因检测膜条及其引物

摘要

本发明公开了一种用于多种细菌的基因检测膜条及其引物。选取10种常见细菌为检测对象，以16S rRNA基因为检测靶基因，设计10种常见细菌的检测探针及其配套引物。用硝酸纤维素薄膜条作为固定探针的基质，制成10种常见细菌的基因检测膜条。PCR扩增细菌的16SrRNA基因片段，生物素标记。PCR扩增片段与膜条杂交后，采用碱性磷酸酶标记的链亲和素检测生物素标记，然后NBT/BCIP显色。结果表明该膜条能单独检测10种细菌中的任何一种或几种。本发明成功研制了10种常见细菌的基因检测膜条，建立了用膜条检测细菌的方法，该方法具备高通量、快速、准确、成本较低的特点，并具有良好的临床应用前景。

主权项

一种用于多种细菌的基因检测膜条，其特征在于，包括用于扩增细菌的16S rRNA基因片段的一对引物：250F：CCTACGGGAGGCAGCAGT；1020R：CGGGACTTAACCCAACAT；以及固定有如下所示序列探针中的一种或几种的硝酸纤维素薄膜条，所述探针序列如下：大肠埃希菌检测探针：TCC ACG GAA GTT TTC AGA GAT GAG AAT GTG CCT TCG GGA ACC GTG AGA CA肠道沙门菌检测探针：TCC ACA GAA CTT TCC AGA GAT GGA TTG GTG CCT TCG GGA ACT GTG AGA CA粘质沙雷菌检测探针：TCC AGA GAA CTT TCC AGA GAT GGA TTG GTG CCT TCG GGA ACT CTG AGA CA阴沟肠杆菌检测探针：TCC AGA GAA CTT AGC AGA GAT GGT TTG GTG CCT TCG GGA ACT CTG AGA CA奇异变形杆菌检测探针：TCC AGC GAA TCC TTT AGA GAT AGA GGA GTG CCT TCG GGA ACG CTG AGA CA铜绿假单胞菌检测探针：TGC TGA GAA CTT TCC AGA GAT GGA TTG GTG CCT TCG GGA ACT CAG ACA CA鲍曼不动杆菌检测探针：TAC TAG AAA CTT TCC AGA GAT GGA TTG GTG CCT TCG GGA ATC TAG ATA CA枯草芽孢杆菌检测探针：TCC TCT GAA AAC CCT AGA GAT AGG GCT TCT CCT TCG GGA GCA GAG TGA CA溶血性葡萄球菌检测探针：TCC TTT GAC CCT TCT AGA GAT AGA AGT TTC CCC TTC GGG GGA CAA AGT GA金黄色葡萄球菌检测探针：TCC TTT GAC AAC TCT AGA GAT AGA GCC TTC CCC TTC GGG GGA CAA AGT GA。