[发明专利]一次性同时定量测定多种抗生素的方法

摘要

本发明涉及一次性同时定量测定多种抗生素的方法，包括：(1)制备样品滤液；(2)设定液相色谱条件和质谱条件；(3)用上述的液相色谱条件和质谱条件测定步骤(1)中制备的样品滤液，分析数据确定分析样品中抗生素的种类和含量。本发明可以用一次实验同时检测出多种抗生素并同时对所检出的抗生素进行定量，液相色谱-质谱联用既解决了液相色谱中出峰时间相近的波峰难分离的问题，又克服了质谱中低离子电流强度出峰不明显而带来的误差；本发明可以广泛应用于粪便、土壤、水体、食品等各种样品中抗生素的检测及定量分析。

主权项

一次性同时定量测定多种抗生素的方法，包括：(1)将样品提取液以1滴/s的速度经过固相萃取柱，待上清液完全流出后，依次用2‑8mL水和2‑8mL体积浓度为5％的甲醇水溶液淋洗，弃去全部流出液；然后将上述的固相萃取柱减压抽干2‑8min，再用8‑12mL体积浓度为10％的甲醇乙酸乙酯溶液洗脱，将洗脱液在35‑45℃吹氮气，浓缩至干得残渣，用1mL标准溶解液溶解所述的残渣后过0.45μm滤膜，得样品滤液；(2)液相色谱条件为：色谱柱Inertsil ODS‑3，流速0.4mL/min，检测波长：265nm；进样量10μl，流动相为乙腈和体积浓度为0.2％甲酸水溶液，得液相色谱图；其中洗脱梯度为0min时，乙腈的体积比为40％，其余为体积浓度为0.2％的甲酸水溶液；8min时，乙腈的体积比为60％，其余为体积浓度为0.2％的甲酸水溶液；10min时，乙腈的体积比为60％，其余为体积浓度为0.2％的甲酸水溶液；25min时，乙腈的体积比为40％，其余为体积浓度为0.2％的甲酸水溶液；30min时，乙腈的体积比为40％，其余为体积浓度为0.2％的甲酸水溶液；质谱条件：离子化方式为电喷雾电离源正源模式，离子源温度320℃，喷雾电压3000V，氮气流量10ml/min，得质谱图；(3)用上述的液相色谱条件和质谱条件测定步骤(1)中制备的样品滤液，根据从质谱图中提取的单个抗生素离子流图，读出不同时间间隔内的出峰面积，根据标准曲线求出对应抗生素的浓度；然后通过液相色谱图中的出峰面积与标准品的出峰面积比照，确定抗生素的种类，最后对获得的数据进行处理，得出样品中各种抗生素的含量。