[发明专利]玫瑰再生为完整植株的方法

摘要

本发明公开了一种玫瑰再生为完整植株的方法，经玫瑰无菌苗获得、体细胞胚诱导、体细胞胚增殖培养、体细胞胚萌发成苗得到完整植株，本发明方法具有培育周期短，成活率高，增殖倍数高，能够完全保持母株性状，获得的体细胞胚便于长期保存，是遗传转化的重要受体材料。

主权项

一种玫瑰再生为完整植株的方法，它包括以下步骤：1)玫瑰无菌苗获得：将玫瑰的茎段灭菌后再切成1‑2cm的带芽茎段，接种于初代培养基上进行初代培养得到玫瑰的无菌苗，然后在无菌苗增殖培养基上进行增殖和继代；2)体细胞胚诱导：切取继代培养的玫瑰无菌苗的未展开小叶，将其接种于体细胞胚诱导培养基，在黑暗条件下培养，直接诱导出体细胞胚；3)体细胞胚增殖培养：诱导出的体细胞胚接种于体细胞胚增殖培养基，在弱光条件下，进行体细胞胚的增殖和进一步分化，得到成熟体细胞胚；4)体细胞胚萌发成苗：将得到的成熟体细胞胚接种于体细胞胚萌发成苗培养基，在正常光照条件下，使其再生出植株；其中，初代培养基和无菌苗增殖培养基为：MS基本培养基，6‑BA0.5mg/L，NAA，0.01mg/L，琼脂7.5g/L和葡萄糖30g/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0；所述体细胞胚诱导培养基成份如下：MS基本培养基，2，4‑D3‑4mg/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶3g/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0；所述体细胞胚增殖培养基成份如下：MS基本培养基，2，4‑D0‑0.5mg/L，6‑BA 0‑0.05mg/L，CH1.0g/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶3g/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0；所述体细胞胚萌发成苗培养基成份如下：1/2MS基本培养基或MS基本培养基，6‑BA 0‑0.4mg/L，葡萄糖30g/L，植物凝胶3g/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0。