[发明专利]鸟苷的生产方法

摘要

本发明属于生物医药领域，尤其是一种鸟苷的生产方法。鸟苷的生产方法，包括配制种子培养基、培养种子、配制发酵培养基、接种发酵以及补料发酵后本发明的优点与积极效果通过降低发酵初始葡萄糖浓度和发酵温度，使从种子培养到发酵菌体生长环境不产生大的变化，有利于菌体生长；通过前期葡萄糖与酵母粉的连续流加，在菌体生长过程中维持底物浓度不变的情况下使菌体浓度达到最大；菌体完成之后立即开始流加次黄嘌呤，促进菌体生产鸟苷，使鸟苷产量得以提高。最终使发酵液中鸟苷浓度从30g/l提高到36g/l以上，发酵液中鸟苷浓度提高了20％。

主权项

鸟苷的生产方法，包括配制种子培养基、培养种子、配制发酵培养基、接种发酵以及补料发酵，其具体步骤如下：a、配制种子培养基，在水中按重量百分比加入葡萄糖2‑4％、味精0.3‑1％、蛋白胨0.5‑1.5％、酵母浸出物粉0.5‑1.5％、NaCl 0.2‑0.3％、尿素0.1‑0.3％、玉米浆0.5‑1.5％，然后用NaOH和盐酸调节pH7.0‑7.2，并110℃‑120℃灭菌10‑20分钟，得到种子培养基；b、培养种子，将鸟苷生产菌接入种子培养基中，接种量为8％‑15％，然后在33℃‑35℃的温度下，保持pH值在6.5的条件下在5L的自动控制发酵罐中培养至对数期；c、配制发酵培养基，在水中按重量百分比加入葡萄糖4.5‑5.5％、味精0.8‑1.2％、硫酸铵0.7‑0.9％、酵母粉0.8‑1.2％、硫酸镁0.3‑0.45％、磷酸二氢钾0.15‑0.25％、氯化钙0.15‑0.25％、豆饼水解液1.5‑3.3％、玉米浆1.5‑1.9％，消泡剂0.03‑0.05％，用NaOH和盐酸调节pH7.0‑7.2，，并110℃‑120℃灭菌10‑20分钟，得到发酵培养基；d、接种发酵，将步骤b中培养的种子按8％‑15％的接种量接入含有发酵培养基的50L自动控制发酵罐中进行发酵，时间为8h，温度为0‑4h为33.9‑34.1℃，4‑8h为34.9‑35.1℃；e、补料发酵，在d步骤中8h以后将温度控制在35.9‑36.1℃，通过流加氨水将pH控制在6.5，溶解氧控制在40％，开始流加葡萄糖、酵母粉、豆饼水解液的水溶液，其中葡萄糖、酵母粉、豆饼水解液的重量分别为d步骤中接种发酵后的总发酵液重量的10％、0.6％、2％，流加时间为16h，结束后开始缓慢流加次黄嘌呤促进鸟苷生产，再过24小时结束生产。