[发明专利]一种人角膜上皮细胞系的构建方法有效
| 申请号： | 201110039014.0 | 申请日： | 2011-02-16 |
| 公开（公告）号： | CN102168064A | 公开（公告）日： | 2011-08-31 |
| 发明（设计）人： | 樊廷俊;赵君;杨洪收;徐彬;孙爱 | 申请（专利权）人： | 中国海洋大学 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12R1/91 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人： | 张中南 |
| 地址： | 266100 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种人角膜上皮细胞系的构建方法，构建方法是先将角膜消毒，再将角膜消化后，取下带有前弹力层的角膜上皮，剪成小的组织块后，将组织块向下平贴于培养孔的底部，然后加入培养液在二氧化碳培养箱中、37℃下进行贴板培养，培养期间更换培养液，细胞长成单层后进行传代培养，现已传至60代以上完成了人角膜上皮细胞系的构建；其中，培养液为含有20％胎牛血清、0.02‰～0.04‰的人表皮细胞生长因子、0.01‰～0.02‰的人碱性成纤维细胞生长因子、0.4‰～1.0‰羧甲基壳寡糖和0.25‰～1‰硫酸软骨素的DMEM/F12培养液，此外培养液还添加了0.08‰～0.1‰的IV型胶原。本发明的构建方法利用人角膜上皮组织成功建立了未经转染的人角膜上皮细胞系，建立的细胞系可以连续传代，能提供出大量的人角膜上皮细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 角膜 上皮 细胞系 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种人角膜上皮细胞系的构建方法，其特征在于所述的构建方法是先将角膜取出后用含抗生素的消毒液消毒，再将角膜进行消化处理后，取下带有前弹力层的角膜上皮，剪成小的角膜上皮组织块后，将角膜上皮组织块贴于培养孔的底部，使角膜上皮面向下；然后加入培养液在二氧化碳培养箱中、37℃下进行贴板培养，培养期间换培养液，细胞长成单层后用胰酶消化法进行继代培养，培养至第60代完成了人角膜上皮细胞系的构建；其中，培养液为含有20％胎牛血清、0.02‰～0.04‰的人表皮细胞生长因子、0.01‰～0.02‰的人碱性成纤维细胞生长因子、0.4‰～1.0‰羧甲基壳寡糖和0.25‰～1‰硫酸软骨素的DMEM/F12培养液。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国海洋大学，未经中国海洋大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201110039014.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
