[发明专利]一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法

摘要

一种过氧化物酶电极的制备及其使用方法，属于化学分析、环境监测和环境保护领域范畴，具体来讲涉及一种用于测定水中酚类化合物含量的过氧化物酶电极的制备及其使用方法。其特征在于是一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，铂片为基体，碳粉纳米管为电子载体，微晶纤维素作为固定化网格载体，加入效应物D-山梨醇制成一种用于检测水样中的酚类化合物的含量的辣椒过氧化物酶固定化电极的方法，本发明制备的电极具有抗干扰、使用寿命长、活力高，稳定性强的优点，测量同一扫描速度下不同酚类化合物浓度的循环伏安曲线，获得阳极峰电流大小与酚类化合物浓度的关系，优点是可直接测定水溶液中酚类化合物浓度，该法具有快速、准确、重复性好等优点。

主权项

一种过氧化物酶电极的制备方法，其特征在于是一种以干红辣椒为原料提取辣椒过氧化物酶，铂片为基体，碳粉纳米管为电子载体，微晶纤维素作为固定化网格载体，加入效应物D‑山梨醇制成一种用于检测水样中的酚类化合物的含量的辣椒过氧化物酶固定化电极的方法，其具体制备方法步骤为：I、辣椒过氧化物酶的制备以市场销售的干红辣椒为原料经粉碎过80～100目，称取粉碎过80～100目的20～50g干红辣椒粉，加入200～500mL的蒸馏水于0℃下超声波超声20～40min，抽滤，离心后得粗提液，先用饱和度为0.4的硫酸铵溶液对提取的粗提液进行透析，离心后得上清液，再用饱和度为0.8硫酸铵溶液对上清液进行透析，离心后的沉淀，将所得沉淀加入1～2倍体积‑14～‑16℃丙酮分级分离进行透析，透析后的溶液利用截留分子量为5000～10000的超滤膜过滤得到辣椒过氧化物酶，在4～6℃保存。II、过氧化物酶电极的制备将0.5～1.5cm2大小铂片进行预处理：在1moL/L NaOH溶液中浸泡0.5～1h，然后取出用棉球蘸取蒸馏水擦洗表面，在1moL/L H2SO4溶液中，在‑0.675～1.675V的电极电位范围内以40～60mV/s的扫描速度，循环40～50次后，取出再用水冲洗干净晾干待用，取5～10mL N，N‑二甲基甲酰胺为溶剂加入20～40mg微晶纤维素和20～40mg碳粉纳米管超声10～20min混合均匀，取预处理过的铂片，以其对角线为分界线，均匀涂抹一层微晶纤维素‑碳粉纳米管薄膜，自然干燥40～50h备用，将上述制备的50～150μL的辣椒过氧化物酶和10～50μL D‑山梨醇均匀地滴在干燥的微晶纤维素‑碳粉纳米管薄膜表面，使其缓慢地完全渗入，后置于4～6℃冰箱中20～24h凉干，得到本发明的辣椒过氧化物酶电极，用蒸馏水反复冲洗数次备用。