[发明专利]吴茱萸及其提取物的高压液相指纹图谱的建立方法

摘要

本发明提供了一种贵州余庆GAP吴茱萸药材及提取物的HPLC指纹图谱质量控制方法，包括供试品溶液的制备，提取物的制备，色谱条件的确定，使用高效液相色谱仪进行测定，并首次选用吴茱萸的两种伪品(花椒、马桑子)完成指纹图谱适用性检验，得到吴茱萸药材及其提取物HPLC指纹图谱，较全面地表达了吴茱萸药材及其提取物的整体化学信息，确定其指纹特征，该指纹图谱囊括了水溶性部分和脂溶性部分，具有方法简便、重复性好、特征峰多、准确可靠的特点。所建立的HPLC指纹图谱能有效地控制吴茱萸药材及其提取物的质量及用于真伪鉴别。

主权项

一种贵州余庆GAP基地吴茱萸高效液相色谱指纹图谱的建立方法，其特征在于包括以下步骤：步骤一，供试品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的样品粉末0.1g～1g，过60目筛，置于具塞锥形瓶中，加入体积比为45％～90％的甲醇溶液25mL～50mL，称重，超声处理10分钟～90分钟，放冷，称重，补足减失的重量，滤过，取续滤液适量，以0.45μm微孔滤膜滤过，即得；步骤二，高效液相色谱分析：精密吸取步骤一的供试品溶液2μL～20μL进样，色谱条件如下：色谱柱为Diamonsil C18柱，填料粒径2μm～8μm，柱长150mm～250mm，柱温：20℃～35℃；流速：0.8mL·min‑1～1.2mL·min‑1；色谱峰光谱采集范围：190nm～400nm，流动相按体积比由甲醇‑0.01～0.02％磷酸水溶液(pH 2.95～3.05)混合而成，采用线性梯度洗脱方式：从0分钟→35分钟→40分钟→53分钟→56分钟→80分钟，甲醇比例：15％→31％→50％→53％→72％→95％(体积比)，0.02％磷酸水溶液比例：85％→69％→50％→47％→28％→5％(体积比)，检测波长250nm±2nm；得到吴茱萸HPLC指纹图谱；步骤三，分析比较：测定12批吴茱萸药材样品高效液相色谱指纹图谱并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的吴茱萸药材指纹图谱，该指纹图谱具有的22个共有峰的保留时间tR分别为：10.0分钟、12.5分钟、14.0分钟、16.5分钟、17.4分钟、18.7分钟、23.0分钟、24.6分钟、26.1分钟、28.2分钟、30.1分钟、36.3分钟、47.7分钟、50.0分钟、51.9分钟、52.6分钟、62.3分钟、65.4分钟、69.4分钟、79.5分钟、81.1分钟、82.6分钟。