[发明专利]农杆菌介导的甜瓜遗传转化方法无效
| 申请号: | 201010572321.0 | 申请日: | 2010-12-03 |
| 公开(公告)号: | CN102080100A | 公开(公告)日: | 2011-06-01 |
| 发明(设计)人: | 于喜艳;马乐园;郝慧;单文英;范建光 | 申请(专利权)人: | 山东农业大学 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 271018 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | 本发明提供了一种高效的甜瓜遗传转化方法,包括以甜瓜子叶或子叶节为外植体,将外植体浸入农杆菌菌液中浸泡,随后在培养基中诱导、培养芽,待芽长到高1-3cm高时,在培养基中生根、移栽。本发明建立的优化转化方法,显著提高了甜瓜的转化效率,解决了甜瓜利用农杆菌转化的难度问题,对甜瓜植物的基因工程研究与应用具有重要价值。 | ||
| 搜索关键词: | 杆菌 甜瓜 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种高效的甜瓜遗传转化方法,其特征在于包括以下步骤:1)将甜瓜外植体浸入农杆菌菌液中浸泡10‑15min,接入MS+6‑BA 6.0mg/L+乙酰丁香酮100μmol/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L的培养基中,暗培养两天;2)将共培养后的外植体转入芽诱导培养基中诱导芽,芽诱导培养基为MS+6‑BA 3.0mg/L+羧苄青霉素500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L;3)将诱导芽转入芽伸长培养基中培养,芽伸长培养基为MS+6‑BA 0.1mg/L+羧苄青霉素500mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L;4)待芽长到高1‑3cm,转入生根培养基MS+羧苄青霉素300mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L上生根培养、移栽;上述步骤2)‑4)的培养条件为温度25℃,光照16hr/d,光照强度为3000Lx 。
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